Agricultural Science&Technology

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农业基础科学与方法

  • 决策树C4.5算法结合模糊判决算法的土地评价方法(英文)

    杨敬锋;李亭;陈志民;

    为了传统土地评价过程中影响因子存在连续值时难以构建评价模型的缺点,提高土地评价知识表达的可解释性,通过对语义属性采用多重分支,利用分支的统计显著性的启发式技术来实现剪枝,提出了基于C4.5算法挖掘分类规则。并利用模糊推理的方法,给出模糊匹配程度的概念,计算出被评价土地样本与各C4.5规则匹配的模糊程度,然后从中找出模糊匹配程度最大的所对应的规则,被评价样本即可被评价为该规则的结果所示的土地等级。文章提出了一种基于C4.5算法和模糊判决算法的土地资源评价模型构建方法,通过广东省土地评价数据库的实验结果表明,该方法能够适用于土地评价当中,当选取100条规则作为规则库进行土地评价时,获得了86.67%的数量准确率和84.80%的面积准确率。

    2010年03期 v.11 1-3+27页 [查看摘要][在线阅读][下载 249K]
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  • 突变基因的积累与生殖隔离形成的一个途径(英文)

    韦文惠;

    通过用RR、Rr和rr3种基因型的适合度之比量化R与r基因在后代中的频率,计算r的频率逐代演变的分岔点,研究随机交配群体中的杂合子适合度低于纯合子适合度的突变基因r在群体中的逐代积累过程。揭示了R与r在遗传中的不相容性;遗传漂变能使r在新群体中有较高的频率,超过分岔点,最终形成生殖隔离;同时生物进化的动力仅有突变、遗传漂变、自然选择这3个条件还不够,还需要有杂合子适合度低于纯合子适合度的突变基因,即原有群体的遗传背景对新突变的排斥作用。

    2010年03期 v.11 4-6+46页 [查看摘要][在线阅读][下载 270K]
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  • 毛细管柱气相色谱法检测大豆中抑菌灵残留(摘要)(英文)

    邵栋梁;

    [目的]建立大豆中抑菌灵的毛细管柱气相色谱法。[方法]试样用丙酮提取。分别选用1:48、3:47、5:45的3种乙醚-正己烷体系,制备3支层析柱,用10 ml正己烷活化,各加入0.2 ml,2.5 mg/L的抑菌灵标准溶液,再分别用45 ml上述3种淋洗液体系淋洗,每5 ml收集1次,分别进样测回收率,以淋洗液体积(V)为横坐标,回收率(%)为纵坐标绘制淋洗曲线。比较后选择3:47乙醚-正己烷淋洗体系,淋洗体积为25 ml。经正己烷液液萃取后,用弗罗里硅土柱净化,经毛细管气相色谱柱分离(柱温采用程序升温方式,初始温度50℃,保持1 min;以25℃/min的速度升至125℃后,再以10℃/min的速度升至300℃,保持3 min。采用恒流条件下无分流进样),用ECD检测器测定。[结果]抑菌灵含量在0.05、0.25、0.5、1.0 mg/L范围内,峰面积与抑菌灵的浓度呈良好线性关系,线性方程为s=12 346C+63(r2=0.999 6)。以信噪比(S/N)为3计算抑菌灵的定性检出限为0.005 mg/kg;以信噪比(S/N)为10计算抑菌灵的定量检出限为为0.05 mg/kg。精密度测定表明,该方法具有较好的准确度和精密度。[结论]建立了大豆中抑菌灵的毛细管柱气相色谱法。该方法简单快速,灵敏度高,可满足粮谷中抑菌灵含量的测定要求,可在实际中应用和推广。

    2010年03期 v.11 7-8+64页 [查看摘要][在线阅读][下载 201K]
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  • 米曲霉原生质体生成条件的研究(摘要)(英文)

    屈二军;李辰曦;李文建;冯振;陈兰英;

    [目的]探讨米曲霉原生质体制备的高效方法。[方法]统计米曲霉菌丝体检测不同生长时间(72、84、96、108、120 h)的菌丝、不同渗透压(分别使用0.8 mol/L蔗糖、氯化钠和葡萄糖溶液作为渗透压稳定剂)和不同组合酶系(溶菌酶、纤维素酶和蜗牛酶、混合酶系的配比按照L9(34)正交设计)下的原生质体产量。[结果]经检测,培养108 h菌丝体、0.8 mol/LNaCl渗透压稳定剂原生质体产量较高。同时溶菌酶(2 mg/ml) +纤维素酶(6 mg/ml) +蜗牛酶(6 mg/ml)组合酶系原生质体产量较高,达9×105个/ml。[结论]原生质体的产量受菌体自身状况和外界条件影响。该研究为大量制备高活力的原生质体及进行细胞融合试验奠定了基础。

    2010年03期 v.11 9-10+61页 [查看摘要][在线阅读][下载 171K]
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  • 利用HPLC建立油菜蜂花粉指纹图谱(英文)

    郝晓莉;周艳明;张馨予;

    油菜蜂花粉中黄酮类物质是一大类复杂的混合物,槲皮素是油菜蜂花粉黄酮类物质中的主要成分。以槲皮素为标准样品,利用高效液相色谱的分离技术和统计学方法,将中药色谱指纹图谱技术引入到食品领域,建立了药食两用食品——油菜蜂花粉的色谱指纹图谱。色谱条件:色谱柱为ODS-C18、键合相4.0 mm×250 mm、5μm紫外检测器、检测波长260 nm、进样量8μl、控制柱温35℃、流速1 ml/min,流动相为乙腈+0.5%磷酸体系。在上述试验条件下,对20个油菜蜂花粉样品的甲醇提取液进行HPLC分析,同时利用国家药典委员会提供的中药色谱指纹图谱相似度评价系统,对各试验条件下得到的油菜蜂花粉色谱图进行评价。结果表明,该方法稳定性相似度为0.943 ~0.957,重复性相似度为0.941 ~0.989,精密度相似度为0.964 ~0.984,20种样品结果相似度为0.900 ~0.997。该方法将成为现行的质量控制方法的有益补充,并最终保证产品的安全性和有效性。

    2010年03期 v.11 107-109+138页 [查看摘要][在线阅读][下载 309K]
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植物生理·生化

  • 东乡野生稻与普通栽培稻中性洗涤纤维·酸性洗涤纤维等含量的对比(摘要)(英文)

    唐文武;吴秀兰;周军;

    [目的]研究不同种类、不同生育时期水稻植株细胞壁化学组分变化规律。[方法]应用Van Soest法对普通栽培稻与东乡野生稻在不同生育时期的植株中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)、酸性洗涤木质素(ADL)等含量进行研究。[结果]NDF、ADF、ADL含量的平均值变化范围分别是55.63% ~71.70%、31.98% ~49.61%、2.68% ~5.71%,其中以蜡熟期的东乡野生稻各含量最高,以抽穗期的协青早B各含量最低。在同一生育时期,不同种类水稻的NDF、ADF含量(除抽穗期的NDF)有显著性差异(P<0.05),以东野的含量最高,秀水110其次,以协青早B含量最低。在同一种类水稻中,不同生育时期的水稻NDF、ADF含量差异均达到显著性水平(P<0.05),以抽穗期的含量最低,乳熟期其次,至蜡熟期含量达到最高峰。[结论]籼亚种水稻的NDF、ADF等含量比普通野生稻和粳亚种水稻低,具有一定的秸秆饲料利用价值。籼型水稻若能尽早收割,秸秆配合青贮发酵与酶解等技术可以作为牲畜的有效日粮。

    2010年03期 v.11 11-14页 [查看摘要][在线阅读][下载 249K]
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  • 外源一氧化氮对增强UV-B辐射后小麦幼苗膜脂过氧化系统的影响(摘要)(英文)

    高宇霞;韩榕;

    [目的]以硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)作为外源一氧化氮(nitric oxide,NO)供体,研究了不同浓度一氧化氮对增强UV-B辐射胁迫后小麦幼苗膜脂过氧化系统的影响。[方法]试验设置3个组:对照组(CK)、紫外线UV-B处理组(B)、UV-B和硝酸钠(SNP)复合处理组(B+SNP),分别于处理后的第0、1、2、3、4天取样进行丙二醛(MDA)含量及CAT、POD、SOD等生理生化指标的测定,3次重复,并进行统计学分析。[结果]UV-B辐射后,小麦幼苗中丙二醛(MDA)含量上升,过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)活性下降,导致小麦幼苗产生氧化损伤;在UV-B辐射之后施加不同浓度的SNP,可以不同程度地缓解UV-B辐射胁迫下小麦幼苗根和叶的氧化损伤,使MDA含量下降,抗氧化酶CAT、POD、SOD活性上升。其中,0.1 mmol/LSNP对叶的氧化损伤缓解作用较明显,0.01 mmol/L SNP则对根的氧化损伤缓解作用较明显。[结论]外源NO供体SNP对小麦幼苗由于UV-B辐射引起的氧化损伤有明显的缓解作用,可增强植物对逆境胁迫的适应能力。

    2010年03期 v.11 15-19页 [查看摘要][在线阅读][下载 655K]
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  • 拟南芥莲座叶芥子油苷对聚乙二醇模拟干旱的响应(摘要)(英文)

    孙晶;杨今朝;于涛;

    [目的]研究拟南芥莲座叶芥子油苷对聚乙二醇模拟干旱的响应。[方法]以PEG-6000模拟干旱胁迫,设置对照组和干旱处理组分别培养拟南芥Columbia生态型种子,并在处理后的第0、4、5、6、7天分别取2组拟南芥莲座叶进行生理指标和芥子油苷含量的测定。叶片相对含水量测定采用烘干称重法(水分占叶片鲜重的百分比);叶片相对电导率和丙二醛(MDA)浓度测定参照李合生的方法;采用高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS)系统进行芥子油苷的测定。[结果]干旱胁迫处理后营养生长时期的拟南芥幼苗莲座叶叶片的相对含水量下降,相对电导率(表征膜透性)及丙二醛浓度增加,受损害程度随处理时间的增加而增强。拟南芥莲座叶芥子油苷总量、脂肪族芥子油苷含量及吲哚族芥子油苷含量均在处理后第5天达到最大值,在处理后第6天迅速下降并低于对照组。各种芥子油苷含量变化存在差异,其中含量最高的4MSOB与芥子油苷总量变化趋势一致且差异显著,脂肪族芥子油苷响应干旱胁迫较吲哚族芥子油苷强烈。4MSOB等部分芥子油苷占芥子油苷总量的比例在干旱处理后发生变化并且与其本身含量变化相关。[结论]干旱胁迫确实对拟南芥莲座叶中芥子油苷总量、脂肪族芥子油苷及吲哚族芥子油苷的含量产生影响,使芥子油苷参与到植物对外界干旱胁迫的防御反应中,但长期的干旱胁迫不利于叶片中芥子油苷的积累。

    2010年03期 v.11 20-24页 [查看摘要][在线阅读][下载 756K]
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农业生物技术

  • 黄瓜α-半乳糖苷酶基因-EGFP融合表达载体的构建(摘要)(英文)

    徐冉;汤雪燕;缪旻珉;曹碚生;

    [目的]构建由CaMV35S启动子调控的黄瓜α-半乳糖苷酶的增强型绿色荧光蛋白(enhanced green flurescent protein,EGFP)融合表达载体。[方法]运用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术,分别以质粒pCambia1303和pEGFP-N1为模板扩增CaMV35S启动子序列和EGFP编码序列;运用反转录聚合酶链式反应(Reverse transcript-PCR,RT-PCR)技术,以黄瓜总RNA为模板扩增黄瓜酸性α-半乳糖苷酶Ⅰ编码序列;将上述3个片段插入表达载体pCambia 1381*c的多克隆位点,构建EGFP位于目的基因C端的α-半乳糖苷酶基因的EGFP融合表达载体。[结果]经酶切、测序等验证,黄瓜α-半乳糖苷酶-EGFP融合表达载体构建成功。[结论]为进一步研究黄瓜α-半乳糖苷酶的亚细胞定位奠定实验基础。

    2010年03期 v.11 25-27页 [查看摘要][在线阅读][下载 245K]
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  • 农杆菌介导银杏遗传转化体系的建立及Gb-DXR基因表达载体的构建(摘要)(英文)

    冯国庆;杨颖舫;李郑娜;成瑜;杨春贤;陈敏;廖志华;

    [目的]为提高农杆菌介导的银杏遗传转化效率提供参考。[方法]以成熟的银杏种子胚为外植体,在无激素MS培养基上预培养48 h后,采用3种农杆菌(C58C1、LBA4404和EHA105)介导将GUS基因导入银杏胚中,经过组织化学染色法检测到GUS瞬时表达活性,对影响GUS基因表达的因素进行初步分析;并构建了银杏内酯前体合成途径上1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶(DXR)的表达载体。[结果]该研究得到较合适的遗传转化方案,即用银杏胚作为外植体,用携带pCAMBIA1304+的EHA105农杆菌进行侵染,共培养3 d,进行GUS染色,结果显示转化后GUS阳性率较高。[结论]该研究为进一步的银杏转基因研究工作奠定了基础。

    2010年03期 v.11 28-32+114页 [查看摘要][在线阅读][下载 594K]
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  • 银杏HDR基因的克隆与功能分析(摘要)(英文)

    杨颖舫;杨春贤;冯国庆;成瑜;李郑娜;陈敏;廖志华;

    [目的]获得银杏HDR基因的克隆并研究HDR基因的功能。[方法]采用RT-PCR技术获得银杏HDR的全长cDNA,命名为GbHDR(GenBank登录号:DQ364231),该基因cDNA全长为1 827 bp,包含1 425 bp的开放阅读框,编码474个氨基酸残基的蛋白;并构建GbHDR的原核表达载体pTrcGbHDR,与原核表达载体pAC-BETA共转入大肠杆菌XL1-Blue,获得β-胡萝卜素工程菌。[结果]克隆基因实际长度为1 441 bp的GbHDR基因,该序列包含1 425 bp的HDR基因ORF,编码474个氨基酸残基的蛋白,其预测分子量为53.2 kD,等电点预测为5.76。功能互补分析表明,GbHDR能推动工程菌XL1-Blue +pTrcGbHDR+pAC-BETA超量表达β-胡萝卜素,在颜色互补平板上呈现β-胡萝卜素特有的橘黄色,证实GbHDR具有典型的HDR基因功能。[结论]获得1株可高量积累β-胡萝卜素的大肠杆菌工程菌,为最终实现β-胡萝卜素代谢工程提供侯选基因和作用靶点。

    2010年03期 v.11 33-36页 [查看摘要][在线阅读][下载 832K]
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  • 建兰ISSR-PCR反应体系的建立和优化(摘要)(英文)

    王朝雯;孙小琴;杨柏云;

    [目的]研究建兰[Cymbidium ensifolium(Linn.) Sw]总基因组DNA的提取方法,并对建兰ISSR-PCR反应体系进行优化,建立更为完善的反应体系。[方法]用改良的CTAB法提取叶片的基因组DNA,用1.0%琼脂糖电泳检测DNA质量;用分光光度计测定其纯度和浓度,DNA纯度以OD260/OD280的比值来估算,浓度估算法为:DNA浓度(ng/μl) =OD260×50×稀释倍数。计算DNA获得率(DNA量/所用叶片量×100%)。对建兰ISSR-PCR反应的4项影响因素(DNA模板、TaqDNA聚合酶、Mg2 +和dNTPs)逐个作5水平进行研究,以筛选最优的建兰ISSR-PCR反应体系。[结果]获得高质量的建兰基因组DNA,以及优化了的建兰ISSR-PCR反应体系,即25μl PCR反应体积中,2.5μl 10×PCR buffer,2.5 mmol/LMgCl2,240 ng模板DNA,160μmol/LdNTPs,1.25 UTaqDNA聚合酶,0.4μmol/L引物,双蒸水15.78μl。最佳扩增程序为:94℃预变性5min,然后进行40个循环:94℃变性30 s,50 ~60℃退火(退火温度随引物不同而定) 30 s,72℃延伸50 s,72℃延伸7 min。[结论]建立了建兰ISSR-PCR反应体系最适合的条件,为进一步利用ISSR分子标记技术进行建兰遗传多样性研究提供了基础。

    2010年03期 v.11 37-40页 [查看摘要][在线阅读][下载 472K]
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  • 一种适宜拟南芥PCR检测的DNA提取方法(摘要)(英文)

    徐平丽;赵晋平;孟静静;李保龙;李新国;郭峰;

    [目的]介绍一种适于拟南芥PCR检测的DNA快速提取方法。[方法]通过对常规DNA提取方法的改进(省去液氮研磨和苯酚提取的步骤),获得可以快速大批量地提取拟南芥DNA样品的方法。于1.5ml Eppendorf管内加入400μl DNA提取液[内含200 mmol/LTri(pH值7.5),25 mmol/LEDTA(pH值8.0),250 mmol/LNaCl,0.5% SDS(W/V)],剪取拟南芥叶片材料少许(1片以下)加入400μl DNA提取液,用微型研磨棒将叶片捣碎至溶液成绿色,放置3 ~5 min;加入400μl氯仿/异戊醇(体积比24:1),混合均匀,12 000 r/min离心5 min;取上清液至另一1.5 ml Eppendorf管内,加入300μl异丙醇,颠倒混合均匀,室温下放置5 min,12 000 r/min离心5 min;弃去上清液,以70%乙醇漂洗,放置晾干,加入100μl灭菌超纯水溶解,4℃放置备用。以随机抽取的拟南芥转基因株系和突变株系为样品进行验证。[结果]经过琼脂糖凝胶电泳及紫外吸收检测,DNA样品完整且污染少,PCR扩增目的片段结果良好,适于作为PCR反应的模板。经过对随机抽取的拟南芥转基因株系和突变株系的PCR检测,阳性植株目的基因扩增条带清晰,无假阳性,试验结果理想。[结论]该方法适用于拟南芥DNA样品的快速提取、PCR检测及拟南芥突变体筛选工作。

    2010年03期 v.11 41-42+155页 [查看摘要][在线阅读][下载 278K]
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  • 甘蔗茎RNA提取方法研究(摘要)(英文)

    陈萍;罗挺;蔡文伟;

    [目的]找出提取甘蔗茎RNA的适宜方法。[方法]采用SDS法、试剂盒法、GHCL法3种方法提取甘蔗茎基因组RNA,并对提取的RNA进行质量比较。[结果]试剂盒法提取的RNA产率高,电泳条带清晰,RNA完整性好,无明显降解,OD260/OD280比值较好。试验操作要点:在RNA的提取过程中必须使操作温度保持在4℃左右(操作时温度可以通过垫加冰块来实现),从而充分抑制RNase的活性;植物组织称取要适量,将植物组织在液氮中充分研磨后,应在液氮还未充分挥发前将研磨物加入Eppendorf管中,样品要充分研磨,通过加大提取液中变性剂的量防止在此过程中内源RNase将植物组织中RNA降解;在用酚/氯仿/异戊醇抽提及氯仿/异戊醇抽提过程中,吸取上清液时,应尽量小心,不要吸取中间层从而防止酚类、蛋白质类的干扰。此外,提取的RNA还应及时保存于-70℃低温下,避免频繁冻融影响其质量以及RNA的降解。[结论]试剂盒法是有效提取甘蔗茎RNA的方法。该研究为甘蔗的分子生物学研究奠定了基础。

    2010年03期 v.11 43-46页 [查看摘要][在线阅读][下载 268K]
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  • 东北红豆杉RAPD反应体系的优化(摘要)(英文)

    肖璐;许明子;崔苗;刘博;

    [目的]研究东北红豆杉RAPD反应体系的优化条件。[方法]以东北红豆杉叶片为材料,用改进CTAB法提取DNA,分别从模板DNA浓度(10、20、30、40、50 ng)、引物浓度(5、10、15、20、25 pmol/μl)、dNTP浓度(0.1、0.15、0.2、0.25、0.3 mmol/L),TaqDNA聚合酶量(0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 U)及镁离子浓度(0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mmol/L)5个方面对东北红豆杉RAPD扩增效果的影响进行分析。[结果]用改良的CTAB法提取红豆杉基因组DNA,所得DNA质量较好,无杂质存在,条带整齐一致,而且能够取得比较理想的RAPD扩增效果。通过各因子的比较分析,建立了东北红豆杉RAPD优化体系:20μl PCR反应总体积中含模板DNA10 ng,Mg2 +2.0 mmol/L,引物15pmol/μl,dNTP0.2 mmol/L,TaqDNA聚合酶1.0 U,10×buffer缓冲液2μl,以双蒸水补充至20μl。[结论]为进一步探索与东北红豆杉性别鉴定相关的研究提供技术支持。

    2010年03期 v.11 47-49页 [查看摘要][在线阅读][下载 263K]
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  • 猪NCOA1基因PCR-RFLP多态性分析(摘要)(英文)

    侯永刚;闫守庆;何晓波;柏蒙蒙;孙泰雷;吴明明;孙金海;

    [目的]研究猪NCOA1基因的PCR-RFLP多态性,为猪的分子育种和标记辅助选择提供理论依据。[方法]以81头山东寿光六和原种猪场的长白猪为研究对象,采取常规酚-氯仿抽提法从猪耳组织提取基因组DNA,以基因组DNA为模板进行PCR扩增获得440 bp的NCOA1基因目的片段,利用限制性内切酶RsaⅠ对PCR产物进行酶切和琼脂凝胶电泳检测,并计算各等位基因频率和基因型频率。[结果]琼脂糖电泳检测酶切产物出现3种基因型:AA型(1条带:440 bp)、AB型(3条带:440、282、158 bp)、BB型(2条带:282、158 bp);基因型频率分别为0.54、0.43和0.03;A和B 2个等位基因的基因频率分别为0.76和0.24。[结论]该研究猪群中,A为优势等位基因,AA基因型频率较高。

    2010年03期 v.11 50-51+134页 [查看摘要][在线阅读][下载 220K]
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  • 13/17罗伯逊易位猪CMYA3基因多态性分析(摘要)(英文)

    孙泰雷;闫守庆;柏蒙蒙;侯永刚;吴明明;李戈;孙金海;

    [目的]对13/17罗伯逊易位杂合子猪[2n=36,rob(13;17)]互交后代中的148个体进行CMYA3基因的多态性分析。[方法]采用PCR-RFLP方法分析CMYA3基因在13/17罗伯逊易位猪群中的多态性。用酚-氯仿抽提法从猪耳组织中提取基因组DNA。以基因组DNA为模板进行PCR扩增,反应体系为25μl:dNTPs 2μl,上下游引物各0.5μl,Taq酶1 U,模板DNA1μl,用ddH2O补足至25μl。PCR反应条件为:94℃预变性5 min;94℃变性30 s,53℃退火45 s,72℃延伸30 s,共35个循环;72℃延伸10 min。PCR产物经PCR纯化试剂盒纯化,限制性内切酶Bsh1236 I 37℃酶切过夜后,1%琼脂糖凝胶电泳,检测酶切结果。[结果]通过PCR扩增所有个体均能获得507 bp的目的片段,PCR产物经限制性内切酶Bsh1236I酶切,琼脂糖凝胶电泳结果表明该基因在此群体中具有A和B 2个等位基因,基因频率分别为0.699和0.301,具有AA、AB和BB 3种基因型,基因型频率分别为0.615、0.169和0.216。因此,在该试验猪群中,A为优势等位基因,AA基因型频率最大。[结论]该研究为13/17罗伯逊易位猪的分子育种和标记辅助选择提供了理论依据。

    2010年03期 v.11 52-53+67页 [查看摘要][在线阅读][下载 207K]
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  • 凡纳滨对虾3个亲本及其子代群体的SSR分析(摘要)(英文)

    栗志民;谢丽;叶富良;陈国良;

    利用微卫星标记技术,采用8对微卫星引物对凡纳滨对虾3个亲本群体(OI Q、SIS Q、Kona Bay Q)及其子一代(OI Z、SIS Z、Kona BayZ)共计120个个体进行遗传分析。计算6个群体在8个微卫星位点上的平均等位基因数(Na)、平均有效等位基因数(Ne)、平均观测杂合度(Ho)、平均期望杂合度(He)、平均多态信息含量(PIC)和平均Hardy-Weinberg平衡指数(D),以上各参数均采用群体遗传学分析软件POP-GENE3.2处理,同时根据Nei的方法计算群体间的遗传距离和遗传相似系数。运用MEGA3.0软件,采取UPGMA方法根据6个群体的遗传距离进行聚类。结果表明:8对微卫星引物在6个群体中共检测到28个等位基因,每个位点的等位基因数为2 ~6个,平均等位基因数为3.5;各位点的期望杂合度均比观测杂合度高;多态信息含量(PIC)值为0.479 4 ~0.769 9,说明这8个位点在凡纳滨对虾中具有较高的信息含量。在亲本和子代群体遗传结构分析中,子代的有效等位基因数、杂合度和多态信息含量等指标均略低于亲本群体,但子代的遗传多样性并未受到太大影响,仍保持较好的遗传力。

    2010年03期 v.11 57-61页 [查看摘要][在线阅读][下载 430K]
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  • T_(1083)替换NtKRP尾部BD融合载体pGBKT7-TS的构建(摘要)(英文)

    纪耀坤;张伟彬;袁亮;

    [目的]扩增烟草NtKRP基因尾部含T1083替换的片段,将其克隆入pGBKT7载体中。[方法]以pBI121KE质粒为模板进行PCR反应,将得到的PCR产物凝胶回收后等摩尔混合,取适量作为模板,得到含定点突变的尾部片段。将该PCR产物克隆入SmaI线性化的pUC19载体,构建含T1083替换的重组子pUC19Ts。通过蓝白斑筛选得到的重组子进行BamHI -SmaI双酶切鉴定,将筛选出的正确重组子送交联合基因测序。将pGBKT7和测序正确的pUC19Ts质粒均用BamHI -SmaI双酶切,分别回收1 320 bp的融合片段和7.3 kb的载体片段进行连接,转化并筛选得到重组子,任意挑取2个单菌培养后提取质粒进行BamHI -SmaI双酶切鉴定。[结果]成功构建了NtKRP尾部含T1083替换的BD融合质粒载体pGBKT7-TS。[结论]为进一步研究NtKRP尾部T替换对NtKRP与靶物质结合的影响奠定了实验基础。

    2010年03期 v.11 62-64页 [查看摘要][在线阅读][下载 267K]
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  • T_(1083)替换融合质粒载体pGBKT7-T_S转入酵母的自激活试验(摘要)(英文)

    袁亮;纪耀坤;张伟彬;

    [目的]研究T1083替换融合质粒载体pGBKT7-Ts转入酵母的自激活实验,探讨其表达产物是否可作为诱饵进行酵母双杂交筛选。[方法]将T1083替换突变BD融合质粒载体pGBKT7-TS转入酵母后,进行自激活和蛋白表达毒性检测试验。pGBKT7-TS对报告基因自主激活的检测。将pGBKT7-TS质粒转染S.cerevisiae strainAH109和S.cerevisiaeY187菌株,同时分别转入pGBKT7作为对照,在SD-Trp平板上挑取转化菌落,悬于适量无菌水中,再分别接种于SD-Trp +X-α-gal、SD-Trp-His +X-α-gal、SD-Trp-Ade +X-α-gal和SD-Trp-Ade-His +X-α-gal平板。30℃培养2 ~3 d,观察各平板菌落颜色。确定含有pGBKT7-TS质粒的AH109和Y187酵母细胞内HIS、ADE、Mel1、LacZ报告基因的表达情况。pGBKT7-TS对酵母AH109和Y187的毒性检测、挑取大于2 mm的pGBKT7-TS转化的AH109克隆和pGBKT7-TS转化的Y187克隆各1个,分别接种于50 ml SD/-Trp+Kan(20μg/ml)培养基中,30℃、250 r/min培养16 h,检测OD600,若OD600<0.8,则DNA-BD可能有毒性;若OD600≥0.8,说明DNA-BD无毒性。[结果]转化pGBKT7-TS的酵母菌AH109在SD-Trp +X-α-gal平板和SD-Trp-His +X-α-gal平板上均可长出菌落,但在SD-Trp-Ade +X-α-gal平板和SD-Trp-Ade-His+X-α-gal平板上均无菌落生长,表明转入pGBKT7-TS后His报告基因有泄漏表达,但不能激活ADE和MELI报告基因。毒性检测试验中,重复2次,其OD600均大于0.8,说明DNA-BD融合蛋白对酵母AH109和Y187的生长无毒性,可以作为诱饵进行酵母双杂交筛选。[结论]为进一步研究NtKRP尾部T1083替换对NtKRP与靶物质结合的影响奠定了试验基础。

    2010年03期 v.11 65-67页 [查看摘要][在线阅读][下载 183K]
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  • 羊传染性脓疱病毒B2L基因片段重组腺病毒载体的构建(摘要)(英文)

    邵洪泽;毛文智;宋阳;李琳;程荣华;孙健;孙强;

    [目的]利用腺病毒载体系统构建羊传染性脓疱病毒B2L基因重组腺病毒载体。[方法]以从羊传染性脓疱病毒株JLSY04中提取的基因组DNA为模板,PCR扩增获得B2L目的基因片段;然后将B2L目的基因克隆至PD-NR-CMV载体,筛选阳性克隆获得质粒CTC572-6;再将质粒CTC572-6与腺病毒载体进行同源重组,筛选阳性克隆,并进行菌液PCR、酶切、测序等鉴定。[结果]经酶切和基因测序等鉴定,成功构建了携带羊传染性脓疱病毒B2L基因的重组腺病毒载体CTC572Ade-30。[结论]为羊传染性脓疱基因工程疫苗的进一步研究奠定基础。

    2010年03期 v.11 94-97页 [查看摘要][在线阅读][下载 361K]
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园林·园艺

  • 白三叶叶片荧光特性对水分胁迫的响应(摘要)(英文)

    韩建秋;

    [目的]从生理角度研究白三叶(Trifolium repens)叶片叶绿素荧光参数对水分胁迫的响应。[方法]以白三叶品种"海发"为供试材料,设置75%(无胁迫,CK)、50%(轻度胁迫,LD)和25%(重度胁迫,HD)3个土壤含水量水平对植株进行培养,测定水分胁迫对一系列叶绿素荧光参数的影响,并进行统计学分析。[结果]土壤相对含水量为75%和50%时,白三叶叶片叶绿素荧光参数受到的影响不大,说明白三叶在这2种水分条件下能够正常生长;土壤相对含水量为25%时,初始荧光后极显著高于CK和LD处理,原初光能转化效率(Fv/Fm)、PSⅡ电子传递量子产量(φPSⅡ)和光化学猝灭系数显著降低。[结论]白三叶在重度干旱(HD)条件下,生理机能遭到破坏,不能正常生长,表现出旱害症状。

    2010年03期 v.11 54-56页 [查看摘要][在线阅读][下载 348K]
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  • 红掌切花的瓶插保鲜液研究(摘要)(英文)

    麦有专;李海滨;温艺超;李炳武;李善志;雷禄旺;

    [目的]研究红掌切花的瓶插保鲜液,为红掌种植及筛选保鲜方法提供参考。[方法]以红掌(Anthurium seherzerianum)中的常用切花品种‘热情’为试验材料,采用3种不同的瓶插液配方,处理①:2%二甲基琥珀酰肼+1%8-羟基喹啉硫酸盐(HQS) +0.1%Ca(NO3)2+5%蔗糖;处理②:5%蔗糖+0.1 g/L明矾+10 mg/L6-BA;处理③:4%蔗糖+0.08% NaCl+0.01%过磷酸钙+0.01%中药杀菌剂(黄连的乙醇提取液) +0.1 mmol/LNaOH+0.1 mmol/L柠檬酸+10 mg/L6-BA。并与常用红掌保鲜配方(4%蔗糖+50 mg/LAgNO3+0.05 g/LNaPO4)进行对比,筛选最佳的红掌瓶插保鲜液。[结果]试验中处理①的配方比较简单,不能很好地杀菌,处理②虽然含有一定的碳源和营养,也有杀菌剂,但组成较简单,仍不能很好地满足红掌切花采后各方面生理的需要,以配方③为最佳的瓶插保鲜液,保鲜期为23 d,比对照延长了13 d,观赏期达31 d,比对照延长了18 d,效果显著;且配方③明显地减少了红掌佛焰苞的水分丧失,有利于维持组织的含水量,降低细胞膜透性,抑制膜脂的过氧化作用,减少丙二醛含量的积累,提高了SOD的活性,提高了细胞保护酶的活性,增加了脯氨酸和可溶性糖的含量,降低了呼吸速率。[结论]4%蔗糖+0.08% NaCl +0.01%过磷酸钙+0.01%中药杀菌剂(黄连的乙醇提取液) +0.1 mmol/L NaOH+0.1 mmol/L柠檬酸+10mg/L6-BA配方达到了延长红掌佛焰苞保鲜期的目的。

    2010年03期 v.11 151-155页 [查看摘要][在线阅读][下载 650K]
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  • 湿地松松针中莽草酸的提取及含量测定(摘要)(英文)

    谢济运;陈小鹏;李志荣;陈芳;粟本超;

    [目的]研究湿地松针中莽草酸的提取工艺和含量,为更好地开发利用湿地松资源提供科学依据。[方法]用乙醇浸提湿地松松针中的莽草酸,研究不同水平乙醇浓度、料液比、浸提温度、提取时间及浸泡时间对莽草酸提取率的影响。并采用L9(34)正交试验,对固液比、提取时间、提取温度和乙醇的浓度各因素进一步进行正交试验研究,以寻找适宜的工艺条件。用高效液相色谱测定莽草酸含量。高效液相色谱的色谱条件:色谱柱:Alltima NH2(5μm,4.6 mm×150.0 mm);移动相:乙腈-2%H3PO4(90:10);流速:1ml/min;测定波长为213 nm,带宽为16 nm;参比波长为300 nm,带宽为80 nm。[结果]通过单因素和正交试验,确定影响莽草酸提取率的因素主次顺序是:乙醇浓度>提取温度>料液比>提取时间。乙醇浸提法提取莽草酸的最佳工艺:乙醇浓度为60%,提取温度为75℃,料液比为1:25,提取时间为2.5 h。在该条件下,莽草酸的提取率为1.49%。[结论]湿地松松针中的莽草酸可以作为新的莽草酸资源加以开发利用。

    2010年03期 v.11 177-181页 [查看摘要][在线阅读][下载 435K]
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农艺

  • 灌水对强筋小麦氮素代谢及产量的影响(摘要)(英文)

    李晓;姚占军;管涛;郭天财;冯伟;

    [目的]为强筋小麦高产优质栽培的田间水分管理提供参考依据。[方法]在大田条件下,设3个灌水处理水平:即全生育期不灌水(W0),拔节期灌1水(W1),拔节期+孕穗期灌2水(W2),每次灌水定额为600 m3/hm2,研究灌水次数对强筋小麦郑麦9023氮代谢及产量的影响。叶绿素(Chl)含量用分光光度计进行测定并计算,然后转化为干重表示方法;全氮(N)含量测定采用凯氏定氮法;硝酸还原酶(NR)活性测定采用活体法;蛋白质积累动态先测定籽粒氮含量,然后转化为蛋白质含量。[结果]增加灌水次数能够提高旗叶NR活性、叶绿素和氮素含量,在灌浆盛期灌水处理具有明显优势。籽粒蛋白质含量随灌浆进程呈V形变化,随灌水次数增加,蛋白质含量降低,在灌浆中前期不同处理间差异较大,而在灌浆后期差异变小。籽粒产量随灌水次数增多而增加,而籽粒蛋白质含量却降低,籽粒蛋白质产量与籽粒产量表现相同趋势。[结论]适当增加灌水次数,降低了籽粒蛋白质含量,但有利于提高籽粒产量和单位面积蛋白质产量。

    2010年03期 v.11 68-71页 [查看摘要][在线阅读][下载 402K]
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  • 锌对不同基因型玉米产量及氮磷钾锌吸收与分配的影响(摘要)(英文)

    李佐同;杨克军;王玉凤;

    [目的]研究锌对不同基因型玉米产量及氮磷钾锌吸收与分配的影响。[方法]以四单19和牡丹9两种不同基因型玉米为材料,以EDTA-Zn为锌肥料,采用盆栽方法研究锌对不同基因型玉米产量及氮磷钾锌吸收与分配的影响。氮、磷、钾测定:植物样品采用H2SO4-H2O2消煮方法处理。采用瑞士产B CHI凯氏定氮系统测定全氮含量;磷含量测定采用钒钼黄比色法;采用日立Z5000型原子吸收分光光度计测定钾含量;锌含量测定:首先用HNO3-HClO4(4:1)混合液法消煮,再用日立Z5000型原子吸收分光光度计测定。[结果]适量供锌可以提高玉米的穗粒数;在低锌处理下(Zn0、Zn1)各器官锌含量相差较小,随着施锌水平的提高,锌在叶片、茎秆、叶鞘中含量迅速增加,而在籽粒和苞叶中增加幅度较小;玉米吸收的多余的锌主要集中在下部器官,以减轻过量的锌对植株造成的伤害。不同的供锌水平对低锌不敏感品种牡丹9氮、磷、钾的吸收与转运影响较小;相对而言,低锌敏感品种四单19氮、磷、钾的吸收与转运更易受到外界供锌量的影响。[结论]适量供锌可以提高玉米产量和对氮、钾的利用率,降低磷的吸收和利用。

    2010年03期 v.11 72-75+86页 [查看摘要][在线阅读][下载 1050K]
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  • 水稻大粒种质淀粉积累特性研究(摘要)(英文)

    邱献锟;刘宪虎;许明子;李美善;索超;朱成龙;

    [目的]为合理利用水稻大粒种质提供理论依据。[方法]以水稻大粒种质31C122、31C125(千粒重近50 g)和常规水稻品种吉玉粳、赋育333为材料,对其籽粒中糖分和淀粉的积累过程进行对比研究。总糖含量采用苯酚-硫酸法测定,用不同浓度的葡萄糖标准溶液绘制标准曲线。总淀粉含量采用硫酸-蒽酮法测定[10],用不同浓度的葡萄糖标准溶液绘制标准曲线。直链淀粉含量采用农业部颁布的《NY147-88》标准法测定。支链淀粉含量=总淀粉含量-直链淀粉含量。以淀粉积累量W为依变数,开花后天数t(开花日为0)为自变数,应用Logistic方程对淀粉积累过程进行拟合。[结果]供试材料弱势粒总糖含量高于强势粒,且强势粒总糖含量峰值均出现在花后10 d,大粒种质总糖含量低于常规品种;强势粒总淀粉含量高于弱势粒,常规品种总淀粉含量高于大粒种质;供试材料各粒位支链淀粉含量高于直链淀粉,大粒种质直链淀粉含量低于常规品种;大粒种质强势粒总淀粉积累高峰较常规品种强势粒有所推迟,弱势粒总淀粉积累高峰较常规品种有所提前;大粒种质强势粒总淀粉活跃积累期长于常规品种强势粒。[结论]大粒种质的品质好于常规水稻品种。

    2010年03期 v.11 76-81+165页 [查看摘要][在线阅读][下载 1190K]
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  • 转基因大豆MON89788转化体特异性定性PCR检测(摘要)(英文)

    李飞武;李葱葱;董立明;邢珍娟;张明;

    [目的]建立MON89788大豆转化体特异性定性PCR检测方法。[方法]利用TAIL-PCR技术分离MON89788大豆的3′端旁侧序列,据此序列设计3条特异性引物用于旁侧序列的扩增。经过3轮PCR扩增,获得特异性扩增产物,将此产物回收后克隆到pMD-18T载体上测序,所得序列用Vector NTI分析,并提交NCBI进行序列比对。并对该方法的特异性和灵敏度进行测试。[结果]获得了1 142 bp的3′端旁侧序列。经Blast检索比对,该序列包括2部分,1 ~618 bp为载体序列(E9终止子部分序列和LB序列),619 ~1 142 bp为大豆基因组序列;依据该序列建立的PCR检测方法能特异性地从MON89788大豆中扩增出170 bp的产物,检测灵敏度达到0.05%,约为40个起始模板拷贝。[结论]该研究建立的方法特异性强、灵敏度高,可适用于MON89788大豆检测。

    2010年03期 v.11 82-86页 [查看摘要][在线阅读][下载 709K]
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  • 大豆苗期耐低磷筛选指标的研究(摘要)(英文)

    张彦丽;贾健辉;赵月琪;谷思玉;许景钢;

    [目的]探讨简单、可靠的用于大豆苗期磷效率筛选的鉴定指标。[方法]采用高、低磷土壤盆栽试验:①高磷(CK)。施过磷酸钙3.03 g/kg土,尿素[CO(NH2)2]0.075 g/kg土,硫酸钾(K2SO4)0.075 g/kg土;②低磷。只施氮、钾肥,不施磷肥。对大豆苗期的相对株高(RPH)、相对地上部干重(RAW)、相对根系干重(RRW)、相对地上部磷浓度(RAPC)和相对根部磷浓度(RRPC)5个指标进行测定。[结果]相对株高受低磷胁迫影响较小,变异系数仅为9.07%,与其他指标的相关性未达到显著水平;相对地上部干重、相对根部干重、相对地上部磷浓度和相对根部磷浓度受低磷胁迫的影响较大,其变异系数也较大,其顺序为:相对根部干重(26.67%) >相对地上部干重(22.68%) >相对地上部磷浓度(24.015) >相对根部磷浓度(15.87%),各指标间的相关系数呈显著或极显著正相关。[结论]相对地上部干重、相对根部干重和相对地上部磷浓度可以作为综合评价大豆苗期磷效率筛选的重要指标,相对根部磷浓度可以作为辅助筛选指标。

    2010年03期 v.11 87-89+97页 [查看摘要][在线阅读][下载 246K]
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  • 虫鸣和音乐声频对6种蔬菜生长的影响(摘要)(英文)

    柏明娥;姜仕仁;李楠;洪利兴;洪文彬;

    [目的]研究虫鸣声(IS)和音乐+虫鸣声(MS)2种声频处理对萝卜等6种蔬菜生长的影响。[方法]试验设置虫鸣声(IS)处理组、音乐+虫鸣声(MS)处理组和正常对照组(CK),对6种蔬菜栽培实行统一管理,并定期对相关指标进行测定;采用SPSS16.0统计软件进行方差分析和多重比较。[结果]不同声频处理除黄豆株高和白菜、青菜地下部干重外,其余蔬菜的株高、鲜重和干重均和对照组有显著差异;声频处理的6种蔬菜生长状况均显著优于对照组,在生长期间能显著促进株高生长(黄豆除外),并提高食用部分的产量;MS处理对萝卜的株高、全株鲜重、地上部分干重、地下部分干重,芥菜的全株鲜重,黄豆的地上部分干重等生长指标的影响明显优于IS处理。[结论]IS和MS2种声频均具有促进植物生长的作用,但作用效果有所差异。

    2010年03期 v.11 90-93+100页 [查看摘要][在线阅读][下载 571K]
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植物保护

  • 一种利用水提物快速检测水稻矮缩病毒的方法(英文)

    许曼琳;杨金广;

    由水稻矮缩病毒(Rice Dwarf Virus,RDV)侵染所致的水稻普通矮缩病是我国水稻上主要的病毒病之一,广泛分布于我国水稻种植区。研究了一种快速简捷的检测水稻和传播介体中RDV的方法,整个检测过程仅需20 min。利用无菌水(100μl)研磨RDV侵染后的水稻病叶(10 mg)和带毒传播介体黑尾叶蝉(Nephotettixcincticeps)(10 mg),取上清液进行1%的琼脂糖凝胶电泳检测,可稳定地检测到5条特异性电泳条带,大小在1 000 ~5 000 bp,而在健康水稻叶片和无毒叶蝉水提物中检测不到任何电泳条带的存在。为了进一步验证结果的可靠性,再利用RT-PCR对上述样品进行检测,结果表明,在其水提物存在电泳条带的RDV病叶和带毒N. cincticps中均检测到RDVS8片段中1 375 bp的核酸片段,而在阴性对照中均未检测到RDV的存在。该方法可方便快速地检测到水稻和叶蝉中RDV的存在,避免了常规血清学检测和分子检测(RT-PCR和Western-blot)等方法的昂贵试剂和繁琐的操作步骤。

    2010年03期 v.11 98-100页 [查看摘要][在线阅读][下载 207K]
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  • 木薯炭疽病病原鉴定及其生物学特性研究(摘要)(英文)

    蔡吉苗;李超萍;时涛;林春花;黄贵修;

    [目的]分离鉴定木薯炭疽病菌,并进行生物学特性研究。[方法]从我国海南木薯发病叶片上分离到2株木薯炭疽病菌CCGHN01和CCGHN03,分离物的致病性采用针刺法进行确认,通过分生孢子形态观察和ITS序列分析进行鉴定。采用CTAB法提取2个木薯炭疽病菌菌株的基因组DNA,用通用引物ITS1和ITS4进行PCR扩增。扩增产物克隆后各挑3个阳性克隆测序后进行比对以确认其序列,序列在http://www.ncbi.nlm.nih.gov/上进行比较分析。研究2个木薯炭疽菌株的生物学特性,各影响因子包括:培养基种类(马铃薯琼脂葡萄糖、马铃薯琼脂蔗糖、玉米粉、燕麦、麦芽、胡萝卜培养基),菌落生长温度(5、10、15、20、24、26、28、30、33、37、40℃)、pH值(4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0、11.0、12.0)、光照(完全黑暗、完全光照和光暗交替),分生孢子萌发温度(5、10、15、20、24、26、28、30、33、37和40℃)、致死温度(40、45、50、55、60和65℃)。[结果]分生孢子形态观察和ITS序列分析表明2株病原菌为胶孢炭疽菌。生物学特性研究表明,2个菌株生长最适培养基为马铃薯琼脂蔗糖培养基,最适温度分别是26和30℃,最适pH值为8.0,最适光照条件分别是光暗交替和完全黑暗。2个菌株孢子萌发最适温度分别是28和30℃,致死温度为55℃ 10 min。[结论]该研究为进一步防治木薯炭疽病提供了基础。

    2010年03期 v.11 129-134页 [查看摘要][在线阅读][下载 768K]
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动物科学

  • 大黄水煎剂对乌鳢离体肠道运动的影响(摘要)(英文)

    齐红莉;王睿睿;郑宝楠;毛海涛;刘金兰;宋学军;宫雪燕;乔秀亭;

    [目的]观察不同浓度的大黄水煎剂对乌鳢离体小肠运动性能的影响,并探讨其药理作用机制。[方法]采用离体器官法,利用RM6240B生物信号采集与处理系统,记录不同浓度的大黄水煎剂对离体肠道作用前后的张力值。离体小肠平滑肌收缩曲线的描记;离体肠段下端固定在通氧气"L"形倒钩上,上端连接离体肌肉张力换能器,使肠段在恒温28℃今村液的麦氏浴槽内正常收缩。打开RM6240生物信号采集处理系统,以1 g砝码定标,待肠段收缩稳定后,先记录一段肠管在今村生理溶液恒温28℃时的收缩曲线5 min。在预试验的基础上依次将浓度为0.062、0.125、0.250、0.500 g/ml的大黄水煎剂分别取1 ml放入20 ml的今村液中混匀备用,然后分别记录各组加入不同稀释度大黄水煎剂后的收缩曲线5 min,观察肠管的收缩幅度(g)、收缩频率(次/min),并从收缩曲线的基线改变,观察小肠平滑肌张力变化,以收缩基线上升表示张力增强,收缩基线下降表示肌张力减弱。[结果]药液浓度为0.062和0.125 g/ml的大黄水煎剂对乌鳢离体肠道收缩表现出明显的增强作用;药液浓度为0.250和0.500 g/ml的大黄水煎剂对乌鳢离体肠道收缩表现出抑制作用,在用药浓度0.500 g/ml前后差异极显著。可见,大黄水煎剂对乌鳢离体小肠平滑肌自发收缩幅度在低剂量有明显的增强效应,表现为正性变力作用,并呈剂量依赖性;在高剂量时有明显的抑制效应,并呈剂量依赖性,但对收缩频率影响不明显。建议在实际养殖过程中饲料中添加大黄的量为0.062 ~0.125 mg/L,用于鱼类细菌慈宁宫疾病治疗,提高鱼体免疫机能。[结论]大黄水煎剂对乌鳢离体肠道平滑肌的收缩活动有明显的效应。

    2010年03期 v.11 101-103页 [查看摘要][在线阅读][下载 216K]
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  • 金属离子对红白锦鲤肠及肝胰脏蛋白酶活性的影响(摘要)(英文)

    郭永军;魏东;白东清;闫珊珊;吴旋;宁博;陆建权;

    [目的]研究金属离子对红白锦鲤消化组织蛋白酶活性的影响。[方法]以酶学分析方法研究4种金属离子(Na+、K+、Ca2 +、Mg2 +分别来源于NaCl、KCl、CaCl2.2H2O、MgCl2.6H2O,浓度梯度均设置为25、50、75、100、125、150 mmol/L)对红白锦鲤肝胰脏、前肠、中肠、后肠蛋白酶活性的影响。蛋白酶活性的测定采用福林-酚显色法,用Thermo紫外分光光度计,根据OD680计算蛋白酶活性,以1 min水解酪蛋白产生1μg酪氨酸为一个酶活力单位,记为μg/(min.g)。[结果]在设定的浓度范围内(25 ~150 mmol/L),4种金属离子对蛋白酶活性影响不同。K+对肝胰脏和后肠的蛋白酶活性有不同程度的促进作用,其中K+对中肠表现为低浓度促进,高浓度抑制的作用,对前肠蛋白酶表现为抑制作用;Na+对肝胰脏、前肠和后肠的蛋白酶表现为不同程度促进作用,对中肠表现为抑制作用。Mg2 +、Ca2 +对肠及肝胰脏的蛋白酶均表现为不同程度的抑制作用。试验所选用的K+、Na+、Mg2 +、Ca2 +均属矿物元素,其中添加浓度25 mmol/LK+对锦鲤肠蛋白酶活性促进作用最大;浓度150 mmol/L Na+显著提高后肠和肝胰脏蛋白酶活性。这些浓度可作为饲料添加剂中的参考用量。Mg2 +、Ca2 +对锦鲤各消化器官(中肠除外)的抑制作用随浓度的增加蛋白酶活性降低,但考虑该元素系水产动物生长发育所必需,因此可选用低浓度或螯合物进行添加,以提高酶的生物学效价,提高饲料中蛋白的利用率,降低饵料系数,节约蛋白。[结论]该研究可为红白锦鲤消化生理的研究以及配合饲料的开发、优化提供基础数据和理论依据。

    2010年03期 v.11 104-106+122页 [查看摘要][在线阅读][下载 256K]
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  • 青霉素菌渣残留降解物的蓄积毒性研究(摘要)(英文)

    孙全文;张丹参;薛桂平;李凤学;吴淑琴;乔健;

    [目的]初步研究青霉素菌渣残留降解物的蓄积毒性,进而探讨其是否具备作为蛋白饲料投入养殖业开发利用的条件。[方法]通过小鼠亚急性毒性试验,饲喂小鼠不同剂量的青霉素菌渣降解物(3%和6%)连续观察15周,记录每周小白鼠的体重和死亡情况;试验结束后抽样处死,取血测动物肝、肾功能,取心、肝、脾、肾称重,并在光镜下对肝、肾组织做病理学观察。[结果]试验组小白鼠体重、死亡率及肝、肾功能在15周内和对照组差异均不显著(P>0.05)。低剂量组可见肝细胞、肾小管上皮细胞核有碎裂,少数肝、肾细胞有轻度水肿;高剂量组可见小白鼠肝组织中细胞核碎裂并有脂肪滴,多数肝细胞水肿,只有少数肝细胞无明显改变;肾脏可见门管区炎性细胞浸润,肾小管上皮细胞水肿、坏死。[结论]该实验条件下青霉素菌渣降解物对小鼠器官的实质细胞有轻度的毒性作用。

    2010年03期 v.11 110-114页 [查看摘要][在线阅读][下载 718K]
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  • 家蝇幼虫离体血细胞感染大肠杆菌后的形态变化(摘要)(英文)

    晏容;刘晖;贺莉芳;刘流;

    [目的]观察大肠杆菌感染对离体家蝇三龄幼虫血细胞形态的影响,了解参与家蝇幼虫细胞免疫反应的细胞类型。[方法]对家蝇三龄幼虫血细胞进行体外培养,并于培养后2、4、6、8 h对血细胞形态进行观察;离体家蝇三龄幼虫血细胞中加入大肠杆菌菌液,观察感染后不同时间血细胞形态的变化。[结果]家蝇三龄幼虫血细胞培养2 h后可区分血细胞的5种类型,即原血胞、浆血胞、粒血胞、珠血胞、类绛血胞,其中浆血胞又分为大核浆血胞和小核浆血胞2种;培养6 h细胞部分贴壁,少量浆血胞已生长成梭形,部分细胞伸出长短不等的伪足;培养8 h后培养血细胞发生黑化反应,液体发黑,不易观察;感染后2 h粒血胞周围见大量细菌聚集;感染后4 h浆血胞(主要是小核浆血胞)发生变形、碎裂、胞质普遍出现大小不等的空泡;感染后6 h浆血胞、粒血胞聚集成团将细菌包裹形成包囊;感染后8 h培养液完全黑化,已无法观察。,其中未见原血胞、珠血胞、类绛血胞形态的变化。[结论]浆血胞和粒血胞是家蝇幼虫细胞免疫反应的主要参与者,而原血胞、珠血胞及类绛血胞不参与细胞免疫反应。

    2010年03期 v.11 115-117页 [查看摘要][在线阅读][下载 350K]
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  • 包被赖氨酸对绵羊氮消化代谢的影响(摘要)(英文)

    程胜利;李建升;冯瑞林;郎侠;裴杰;岳耀敬;郭宪;刘建斌;郭天芬;

    [目的]研究包被赖氨酸对绵羊氮消化代谢的影响。[方法]采用单因子试验设计,设3个处理组:A组(对照组,只饲喂基础饲粮);B组(赖氨酸组,在基础饲粮的基础上,每天每只羊通过瘤胃投饲4 g赖氨酸盐酸盐);C组[包被赖氨酸组,在基础饲粮的基础上,每天每只羊通过瘤胃投饲7.4 g包被赖氨酸(赖氨酸含量为4 g)],采用全收粪法和全收尿法进行消化代谢试验。定时采集饲料样、粪样、尿样和瘤胃液,研究包被赖氨酸(RPlys)对绵羊体内氮存留的贡献。[结果]向试羊日粮中添加RPlys后,干物质进食量、干物质消化率、进食氮、粪氮排出量各组间差异均不显著,RPlys的添加降低了绵羊尿氮排出(P<0.05),对粪氮排出无显著影响(P>0.05),提高了氮沉积率(P<0.05)。[结论]RPlys的添加有利于氮在绵羊体内的沉积。

    2010年03期 v.11 186-188页 [查看摘要][在线阅读][下载 163K]
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资源与环境

  • 城市化对城乡梯度森林土壤微生物数量变化的影响(英文)

    赵哲霞;郭恢财;

    选取南昌市"农村-郊区-城市"3块人工湿地松林典型样地作为研究对象,测定其土壤养分含量,分析了森林土壤微生物数量年均值和季节性变化。结果表明:土壤容重、全P、pH值表现为增加的趋势,有机C、全N呈下降的趋势;在不同的生态界面年均值都表现为放线菌数量>细菌数量>真菌数量,微生物总数为城市>郊区>农村,细菌与真菌数量为城市>郊区>农村,放线菌数量为郊区>城市>农村;生态界面、季节与微生物放线菌和真菌显著性均达到极显著水平(P<0.001),在不同生态界面土壤中细菌具有显著作用,但季节对细菌无显著影响;生态界面和季节对放线菌、真菌具有极明显的交互作用(P<0.001),而对细菌无显著交互作用(P>0.05);生态界面与放线菌、真菌呈极显著正相关关系(P<0.001),但季节与微生物无显著相关。总体看来,城市化进程既引起了森林土壤理化特性的变化,又使土壤微生物数量受到明显的影响。

    2010年03期 v.11 118-122页 [查看摘要][在线阅读][下载 466K]
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  • 冀鲁豫灌溉条件下冬小麦干旱风险区划方法研究(英文)

    张文宗;张超;赵春雷;刘晶淼;

    分别以冬小麦年生育期降水量平均值加减若干倍样本方差的方法界定不同等级的干旱年份,在以气象产量减产率大于等于3%为标准界定冬小麦受灾年份的基础上,计算了冀鲁豫地区冬小麦旱年的平均减产率,分析了冀鲁豫冬小麦不同旱灾强度的频率分布规律。根据冬小麦干旱灾害风险指数的概念和计算方法,分析了冬小麦干旱灾害风险指数的区域分布规律,并提出了有灌溉条件下的冀鲁豫地区冬小麦干旱风险区划技术方法,以旱年平均减产率、干旱灾害风险指数和冬小麦生育期降水量等因子为指标,采用GIS统计分析功能和叠加分析功能,对冀鲁豫冬麦区干旱灾害造成的冬小麦减产风险进行了区划和评估,实现了不同气候年景下和不同风险区冬小麦减产情况的风险评估,给出了冬小麦旱灾的防灾减灾措施。在考虑灌溉能力的情况下,高风险区主要分布于河北省唐山、廊坊、衡水、沧州地区,山东省德州、济南、莱芜、东营地区,河南省洛阳、济源、焦作、安阳地区。该区冬小麦以冬春连旱为主,防御冬旱最主要的措施是适时浇好冻水;中风险区主要分布于北京、天津地区,河北省衡水、保定邢台部分地区,山东省日照、枣庄、威海地区,河南省郑州、焦作、濮阳、鹤壁地区。该区以春旱为主,防御冬小麦春旱的措施包括培育冬前壮苗,合理灌溉,确保关键期需水,起身后松土,切断毛细管,减少土壤蒸发等;低风险区主要分布于河北省保定、邢台局部地区,石家庄、邯郸大部分地区,山东省潍坊、青岛、烟台、临沂、菏泽、济宁地区,河南省东南大部分地区。该区灌溉条件较好,减灾措施应以节水灌溉为主,积极引导农民群众引进滴灌和喷灌节水技术。还可以采用小水勤灌的方式减少旱灾的影响。

    2010年03期 v.11 123-128页 [查看摘要][在线阅读][下载 461K]
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  • 短毛蓼对Cd的富集特性研究(摘要)(英文)

    邓华;李明顺;陈英旭;于方明;

    [目的]研究锰超富集植物短毛蓼(Polygonum pubescensBl.)对重金属镉的响应和富集特征。[方法]采用Hoagland营养液为培养基质,设定8种镉处理浓度(0、25、50、100、200、500、800、1 000 mg/L)。植株收获后用自来水洗净,记录植物株高、根长,然后将根浸入20 mmol/LEDTA-Na溶液中交换15 min,以去除根系表面吸附的金属离子,最后再用去离子水冲洗3次,用吸水纸吸干表面水分。将植物分为根、茎、叶放至烘箱内,在105℃下杀青30 min,然后在70℃下烘48 h,测定植物各部分干质量,最后用不锈钢粉碎机磨细,过60目尼龙网筛。植物样品采用微波消解法用HNO3+H2O2消解。重金属镉含量的测定采用火焰原子吸收分光光度法(WFX-110型)。[结果]随着培养液中镉浓度的增加,短毛蓼的株高、根长及生物量均呈下降趋势,但在较低浓度(25、50 mg/L)下与对照相比差异均不显著(P>0.05),在较高浓度下(100 mg/L以上)短毛蓼总干重明显减少,差异显著(P<0.05),表明短毛蓼受Cd毒害影响较明显;在试验设定的各种镉处理水平下,短毛蓼根和地上部Cd含量均超过100 mg/kg,Cd富集系数均大于1,当培养液中镉浓度为1 000 mg/L时,地上部镉含量高达3 070.069 mg/kg,根中镉含量高达4 863.96 mg/kg。随着镉处理浓度的增加,短毛蓼对镉的吸收量呈现先增加后降低的趋势,当镉处理浓度为800 mg/L时,根和地上部的镉吸收量均达最大值,分别为878.88 mg/株和2 302.91 mg/株。在试验各处理水平下(CK除外)短毛蓼根和地上部均表现出较强的镉富集能力,根对镉的富集系数为4.86 ~55.88,地上部富集系数为2.72 ~6.52;从转运量系数来看,除对照外,各处理水平下转运量系数为0.73 ~4.95;当Cd处理浓度大于50 mg/kg时,转运量系数超过1。[结论]短毛蓼对镉具有较强的耐受性和富集能力,在镉污染土壤的植物修复中具有一定的应用潜力。

    2010年03期 v.11 135-138页 [查看摘要][在线阅读][下载 267K]
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  • 保墒灌溉条件下冬小麦地土壤水分迁移转化规律研究(摘要)(英文)

    贺军奇;员学锋;汪有科;

    [目的]为田间保墒灌溉提供理论依据。[方法]以小麦品种小燕6号为供试材料,对其进行3种不同的覆盖灌水处理(①秸秆覆盖;②地膜覆盖;③PAM化控调节覆盖),以非覆盖处理为对照,比较不同处理的蓄水保墒效果。[结果]不同保墒措施下冬小麦的耗水量均表现出前期小、中期大、后期小的特点,与对照小麦的耗水规律基本一致,但不同处理冬小麦的耗水强度因灌溉时间及小麦生长状况的不同而有所差异;各保墒处理均可抑制冬小麦开花前土壤水分的无效蒸发;PAM处理0 ~20 cm土层土壤含水量略低于对照,但20 ~50 cm土层土壤含水量略高于对照;不同处理土壤水分的差异主要体现在0 ~50 cm土层。[结论]秸秆覆盖和地膜覆盖的抑蒸效果较好。

    2010年03期 v.11 139-142页 [查看摘要][在线阅读][下载 374K]
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  • 酶对牛粪堆肥物质转化的影响(摘要)(英文)

    任平;徐升运;阮祥稳;赵文娟;

    [目的]研究复合酶添加对牛粪堆肥组分的变化。[方法]试验设置2.0%酶处理组、1.5%酶处理组和对照组,对牛粪堆肥期间的温度、水分、pH值、粗纤维、总有机碳(TOC)、全氮(TN)和发芽指数(GI)进行分析。堆肥含水量测定采用烘干法;粗纤维测定采用酸碱法(以风干物料中的含量来计算);总有机碳测定采用重铬酸钾容量法;全氮测定采用凯氏定氮法;pH值用S-3C型pH计测定,测定溶液为1:5固液比的浸提滤液;GI测定是将上述滤液10 ml置于垫有滤纸的培养皿中,同时设置空白对照(蒸馏水),每个培养皿内放10粒饱满的小青菜种子,然后将其置于30℃培养箱中培养,48 h后测定发芽率和根长,计算发芽指数(GI)。[结果]添加复合酶牛粪堆肥可加速堆肥前期有机物的降解。堆肥期间,2.0%酶处理组、1.5%酶处理组和对照组的粗纤维降幅分别为49.6%、47.0%和29.1%,TOC降幅分别为41.7%、35.3%和21.1%,全氮降幅(前21 d)分别为32.6%、26.8%和19.2%。2.0%酶处理组和1.5%酶处理组堆肥30 d可达到基本腐熟的程度。[结论]复合酶的添加缩短了堆肥周期,有利于牛粪堆肥的腐熟。

    2010年03期 v.11 143-146页 [查看摘要][在线阅读][下载 497K]
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  • 基于GIS的黑河山区流域水文过程要素分析(英文)

    黄清华;杨永国;陈玉华;

    水文过程要素是流域水文物理机制的反映,能够为流域水资源的利用和保护提供重要依据。以黑河山区流域为研究区域,采用SWAT-GIS集成模型平台进行水文模拟,阐述SWAT模型水文过程要素的计算方法,基于GIS技术,并利用1990 ~2000年共11年的径流模拟结果数据,对研究区的水文过程要素进行分析,计算分析流域内降水、径流、入渗、蒸散发、融雪等要素的时空变化特征。黑河山区流域的水文过程要素时空变化研究有利于更加清楚认识该地区水文陆面过程的地域和时间特性。在空间上,沿黑河干流中山带分布的青海云杉植被地区是重要的地下水补给区域,流域东部和高海拔地区为重要的产水源地。同时通过模拟结果分析得出,在年内各月份中,4 ~5月的融雪径流、6 ~8月的地表径流和11月至次年3月的地下径流是黑河干流出山径流产生的主导因素。

    2010年03期 v.11 147-150页 [查看摘要][在线阅读][下载 457K]
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  • 南昌市大气硫沉降的空间变化和来源(摘要)(英文)

    朱仁果;肖化云;谢志英;吴亮红;吴代赦;

    [目的]探讨苔藓组织硫含量和雨水硫酸根浓度的相关性及南昌市大气硫的来源。[方法]在南昌市南昌大学北区、南昌大学前湖校区、电厂、梅岭4个采样点采集石生细叶小羽藓[Bryohaplocladium microphyllum(Hedw.)R.Watanabe et Iwats]样品29个,并在南昌电厂采集煤样9个,然后测定苔藓组织和煤的硫含量和硫同位素值。苔藓组织硫含量ω(S)(%,以干质量计)用元素分析仪(German)测定。苔藓硫同位素测定:采用艾氏卡试剂分离并转化为硫酸钡的方法制备样品,然后用连续流同位素质谱仪CF-IRMS测定硫同位素组成。测定数据采用以国际硫同位素CDT标准标定的国家硫同位素标准(硫化银)进行校正。[结果]南昌大学北区苔藓组织硫含量(0.45%±0.059%)高于南昌大学苔藓组织硫含量(0.26%±0.002%),能反映南昌市雨水硫酸根浓度变化规律。南昌市苔藓硫同位素的变化范围是-0.64‰~9.71‰,其中南昌市市郊梅岭苔藓组织硫同位素值最高(4.02‰~9.71‰),明显高于南昌大学前湖校区(0.55‰~0.56‰)和电厂苔藓组织硫同位素值( -0.64‰~0.45‰)。[结论]对苔藓组织硫含量和硫同位素值相关性的研究表明,南昌市大气硫源主要受到中国北方远距离传输硫和生物成因硫的共同影响。

    2010年03期 v.11 162-165页 [查看摘要][在线阅读][下载 352K]
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  • 喀斯特洼地不同森林类型的坡面径流和土壤流失动态(摘要)(英文)

    张喜;连宾;尹洁;吴永波;崔迎春;

    [目的]定位研究喀斯特洼地不同森林类型的坡面径流和侵蚀量变化。[方法]在喀斯特洼地底部建立雨量观测点,分别在不同森林类型建立径流场,定时定位观测主要指标变化。地表径流量于降雨期间的每日8:00、20:00观测;雨量点观测参见地面气象观测规范。泥沙量测定:在测量蓄水池水位后,将池水搅拌均匀,用量筒取1 000 ml,过滤、烘干、称重,并换算成1次降雨产生的径流悬移质量。土壤取样与相关指标测定参照森林土壤分析方法进行。[结果]不同森林类型地表径流呈单峰型,为2 ~11月,其中6 ~7月间有低谷;径流系数呈双峰型,分别为2 ~5月、7 ~9月;径流变动系数呈三峰型,分别为3 ~4月、7 ~8月、9 ~11月;泥沙浓度呈单峰型,为3 ~5月;侵蚀模数呈双峰型,为3 ~5月、6 ~8月。随着林木生长和植被层结构的发育,径流量呈逐年降低的趋势。不同森林类型径流量同相应的泥沙浓度呈正相关,径流量同相应降雨量和蒸发量的正相关达显著水平,泥沙浓度同相应降雨量和蒸发量的相关性不显著,趋势性明显。通过地表径流量和侵蚀模数拟合分析发现石漠化加剧了地表径流的不均匀性,增加了地表径流量和侵蚀模数。幼林地表土的渗透性小于森林地,不同森林类型表土的渗透性大于底土层。[结论]该研究可为喀斯特地区水土保持、石漠化治理的生物管理技术提供理论依据。

    2010年03期 v.11 166-171页 [查看摘要][在线阅读][下载 760K]
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  • Cr~(6+)胁迫培养对水生植物根际微生物的影响(英文)

    李淑英;周元清;史云东;陈艳;

    采用传统的微生物培养法,在实验室条件下,选择不同浓度的Cr6 +(5、10、15、20、50和80 mg/L)对大薸(Pistiastratiote)、慈姑(SagittariasagittifoliaL.)和穗状狐尾藻(Myriophyllum spicatumLinn.)进行胁迫培养,通过测定3种水生植物根际的微生物区系及与氮循环细菌的数量变化,研究3种水生植物根际微生物对重金属Cr6 +的耐受性。不同的植物根际微生物区系及微生物生理类群所用的培养基和测定方法不同,好氧细菌采用牛肉膏蛋白胨琼脂,放线菌采用改良高氏Ⅰ号培养基,真菌采用马丁氏培养基,硝化菌培养基采用改良斯蒂芬逊培养基,氨化菌采用蛋白胨培养基等。其中好氧细菌、放线菌、真菌、氨化菌用稀释平板计数法,硝化菌、亚硝化菌和反硝化菌用MPN计数法计数。结果表明,在Cr6 +的胁迫下,3类微生物的敏感性可概括为:放线菌>细菌>真菌,耐受性没有表现出明显的规律性;而对氨化细菌、硝化细菌、亚硝化细菌和反硝化细菌的影响多表现为低浓度刺激高浓度抑制的作用,但4种细菌的数量变化又表现出各自的特殊性。随着Cr6 +浓度的增加,当浓度达到15 mg/L时,反硝化和亚硝化细菌数量开始减少,20 mg/L时,硝化细菌数量开始减少,50 mg/L时氨化细菌数量开始减少,4类与氮素循环有关的细菌数量在高浓度(80 mg/L)极大部分都受到了抑制。

    2010年03期 v.11 172-176页 [查看摘要][在线阅读][下载 636K]
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  • 土壤肥力对花生品质的影响(摘要)(英文)

    李新华;郭洪海;杨丽萍;杨萍;万书波;

    [目的]研究影响花生品质的主要土壤肥力因子,量化主要影响因子的作用程度,为花生品质区划、优良品种的选育和高产栽培提供科学依据。[方法]以2008年全国18个花生主产省的花生品质数据及其对应点的土壤数据为基础,通过相关分析、通径分析和逐步回归分析研究肥力因子对花生品质的影响。蛋白质含量测定采用凯氏定氮法;脂肪含量测定采用索氏提取法;油酸和亚油酸含量测定采用气相色谱仪法(以占干物质重量的百分率表示);土壤有机质的测定采用K2Cr2O7-H2SO4氧化法;土壤全氮测定采用凯氏法;土壤速效钾测定采用火焰光度法;土壤速效磷的测定采用钼蓝比色法。[结果]相关分析表明,花生蛋白质含量与土壤全氮含量呈显著正相关关系;花生脂肪含量和油亚比均与土壤有机质含量呈极显著正相关关系。通径分析和逐步回归分析表明,土壤全氮含量是影响花生蛋白质含量的主要因子,它们之间的关系为:Y=0.000 179 4X2+25.597;土壤有机质含量是影响花生脂肪含量的主要因子,它们之间的关系为:Y=0.162X1+43.317;同时土壤有机质也是影响花生油亚比的主要因子,它们之间的关系为Y=0.015 04X1+0.954。[结论]不同肥力因子对花生品质的影响不同,改善花生的品质应通过施用合适配比的肥料来实现。

    2010年03期 v.11 182-185页 [查看摘要][在线阅读][下载 246K]
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其他

  • 北方民用猪舍自然通风的数值模拟(英文)

    陈文娟;董润坚;周海柱;王洁;袁月明;

    以北方地区猪舍为研究对象,采用Fluent软件对5种不同窗口面积的猪舍内自然通风气流场进行三维稳态模拟,并对模拟结果与实测结果进行对比分析。结果表明,合理的窗地比和窗口长宽比决定了通风效果。针对该研究中的实际猪舍,窗地比为1:10的通风死角少,通风均匀性好;长宽比较小的气流滞留区小,通风效果好;窗地比相同的(即窗口面积相同)的情况下,窗口数量越多通风效果越好。模拟值与测量值有较好的一致性,最大相对误差为11.1%,平均相对误差为7.7%。因此可用Fluent软件模拟分析猪舍内气流流场,优化猪舍结构。

    2010年03期 v.11 156-159+185页 [查看摘要][在线阅读][下载 605K]
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  • 烟草坏死病毒完整基因组的统计特征与聚类(摘要)(英文)

    杨硕;

    [目的]提取烟草坏死病毒完整基因组的统计特征,并对其进行聚类分析。[方法]在烟草坏死病毒完整基因组的碱基序列上,用每个碱基及其随后2个碱基所构成的三碱基组排列成一个新的序列S;计算所有64种不同三碱基组在S上出现的概率,得到一个64维向量L;比较各个基因组的L向量,得到8个三碱基组,它们的概率存在明显差异;依照一定的规律,给三碱基组赋予数字代码;最后,对不同来源的烟草坏死病毒完整基因组按照L向量进行K-M聚类分析。[结果]8个三碱基组(CGT;CAA;TAC;TAA;AGG;ATG;ATA;AAG)的出现概率与烟草坏死病毒基因组的遗传变异有着重要关联;4个不同来源的烟草坏死病毒完整基因组,按其遗传变异结果形成2个大类。[结论]该研究方法普遍适用于各种烟草病毒基因序列的分析,为烟草坏死病毒病的防治提供了理论依据。

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  • Instrucions for Authors

    <正>In 2009,Agriculturtal Science & Technology's full-texts have been included by international authority of the search tools CAS.CAS is a team of scientists,creating and delivering the most complete and effective digital information environment for scientific research and discovery.CAS provides pathways to published research in the world's journal and patent literature-virtually

    2010年03期 v.11 100页 [查看摘要][在线阅读][下载 30K]
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  • 卷首语

    2010年03期 v.11 189页 [查看摘要][在线阅读][下载 379K]
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