- 余应弘;谢红军;汤国华;吴云天;袁隆平;
水稻籽粒性状是水稻产量构成的重要因子。反映籽粒形状的指标主要有粒长、粒宽、粒厚及长宽比,而尤以粒长最能反映籽粒形状,籽粒大小则多以千粒重计量。其中水稻粒长遗传复杂,研究结果因材料选择的不同而不同,选择籽粒粒形性状差异大的特殊材料进行研究,结论多趋向于质量性状控制,选择籽粒粒形性状差异小的材料进行研究,结论趋向于数量性状控制。关于粒宽的研究,多数研究结果表明,粒宽由多基因所控制,也有研究认为,个别品种的粒宽受单基因或主效基因所控制,显性方向因组合而不同,且存在细胞质效应。长宽比是决定稻米外观品质的重要指标之一,众多研究表明,谷粒长宽比在F2中基本上表现为正态分布。长宽比性状中加性和非加性基因效应都很显著,以加性效应为主。关于粒厚遗传的研究结论相差不大,多数研究表明粒厚受多基因控制。大部分研究认为,粒重在F2代基本上呈正态分布,是由多基因加性效应所控制的数量性状。也有研究认为,粒重的遗传受许多非等位基因的相互作用,存在细胞质效应。在遗传环境中,一般认为粒重是受多基因的加性效应所控制。笔者认为,粒重的遗传不能简单的看作数量性状遗传,粒重的遗传研究结果与研究过程中选择材料的不同而不同。有些特殊材料的粒重遗传就表现为质量性状。随着水稻粒形研究的深入,近年来,越来越多的学者开始研究粒形各性状间的遗传关系。多数研究认为,粒长与长宽比、千粒重以及粒宽与粒厚、千粒重均呈正相关;粒宽与长宽比呈负相关,与粒厚呈正相关;粒厚与千粒重呈正相关。经过多年的遗传研究探索,水稻粒形遗传研究取得了较大的进展,但在某些方面仍有待加强。在水稻粒形遗传中,需拓宽粒形研究面、加强粒形遗传机制研究和对特色资源粒形遗传及潜在价值研究等。
2009年05期 v.10 1-5页 [查看摘要][在线阅读][下载 358K] [下载次数:556 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:15 ] |[阅读次数:142 ] - 李景环;云锦凤;都日斯哈拉;邢婧民;
对加拿大披碱草与老芒麦种间杂种F1的形态学和细胞学特征进行研究。形态学观察结果表明,杂种F1的穗形介于双亲之间,呈半弯曲形,其母本加拿大披碱草植株浅绿色,茎粗糙,穗粗大而弯曲,每节2~3小穗,颖和外稃粗糙具短毛。父本老芒麦全株粉绿色,穗状花序疏松下垂,每节2小穗,每小穗3~5小花。杂种F1植株灰绿色,粗糙,外稃和颖具柔毛,偏向母本加拿大披碱草。加拿大披碱草染色体都是由中部着丝粒染色体组成,染色体相对长度范围在10~4.65,最长染色体与最短染色体之比为2.2:1,臂比介于1.14~1.35。染色体核型公式为2n=4x=28m,属于1A类型。老芒麦染色体核型公式为2n=4x=22m+6sm,属于1B型;F1的染色体数为2n=4x=28,染色体相对长度的变异范围在8.83~4.42,臂比值变化在1.00~3.33。其中,第1、5、7、9、11、12、13、14对染色体为正中着丝粒(M)染色体,第3对为近端着丝粒染色体,剩下的染色体为中部着丝粒染色体,其中,正中着丝粒(M)染色体的数目增加,近中着丝粒染色体(sm)已不存在。L/S恰好为2:1,核型类型为2B。核型公式为2n=4x=16M+10m+2st。通过形态学和染色体的核型分析可以初步确定,F1是真杂种;但杂种F1不结实。加拿大披碱草和老芒麦含有落后染色体细胞的频率较低,分别为0.96%和2.76%;F1减数分裂后期染色体的分配出现了异常行为,染色体有落后现象,落后的染色体细胞频率较高,达87.37%,F1在减数分裂中期一部分染色体也能配对形成二价体,但染色体配对杂乱无章,棒状二价体占多数,环状二价体较少,且出现多价体。
2009年05期 v.10 67-71页 [查看摘要][在线阅读][下载 481K] [下载次数:84 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:120 ] - 杨旭;代西梅;
[目的]建立一套简单易行的染色体压片技术,获得水稻染色体资料。[方法]采用朱微的植物染色体及染色体技术中的压片法,并在此基础上作了进一步改进。细胞有丝分裂观察:①材料准备。种子浸泡24h后,置于培养皿中,于25℃暗培养箱中生根培养。②固定。当嫩根长至1~2cm时,于9:00~11:00用卡诺固定液(酒精:醋酸=3:1)固定2~24h。再用70%酒精清洗后置于70%酒精中保存备用。③解离。将固定好的材料取出放入解离液(无水乙醇:37%的浓盐酸=1:1)中室温下解离5~10min。解离时间根据温度的不同而不同,在试验中做好调整。④染色。彻底洗去解离液的根尖置于解剖镜下,找出分生区(一个解离良好的材料分生区在解剖镜下是不透明的,而成熟区和根冠部分则是透明的),用刀片将分生区切为2~3部分,使其细胞更易着色。然后在载玻片上滴卡宝品红染色液染色10min。⑤压片。⑥镜检取像。细胞减数分裂观察:①取材。幼穗当剑叶的叶枕距为0左右时,处于减数分裂期。于8:00~11:00采集水稻幼穗,用卡诺氏固定液固定24h(置于4℃冰箱内),再用70%酒精清洗2~3次后,保存于70%酒精中备用。②制片。取1朵颖花的3~6枚花药置于洁净载玻片上,用刀片或解剖针将花药横向切断,用镊子挤压花药,使花粉母细胞从花药中逸出,再用镊子清除药壁等残渣。滴1滴卡宝品红染液于花药上,染色5min。之后压片。③观察取像。先在低倍镜下寻找具有分裂相的花粉母细胞,然后依次转换到高倍镜观察减数分裂各时期染色体的行为和形态特征。最后用油镜观察染色体分裂行为并取像。[结果]水稻有丝分裂包括间期、前期、中期、后期、末期5个时期,中期的染色体缩至最短,是观察与研究染色体的好时期。水稻减数分裂包括减数分裂I、减数分裂II2个过程,其中在减数分裂I过程中发生了染色体复制,减数分裂II过程中仅发生了细胞分裂。[结论]改进后的水稻染色体压片技术能够获得准确的染色体资料,可为育种和遗传操作提供依据。
2009年05期 v.10 96-99页 [查看摘要][在线阅读][下载 688K] [下载次数:352 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:59 ] - 袁志华;李英俊;
[目的]研究小麦茎秆弯曲特性与密度间的关系。[方法]取郑麦9023和豫麦25茎杆基部第2节间,去掉叶鞘,做弯曲试验以及密度测定试验。利用微机控制非金属材料万能试验机,采用三点弯曲法对去鞘茎秆做弯曲试验。加载前,用游标卡尺测定茎秆外径及节间长度。采用非接触式光学应变引申仪测定变形量,加载速率为10mm/min。当茎秆发生明显的曲折时,停止加载。根据荷载挠度曲线,计算弯曲强度值、弹性模量值、抗弯刚度值。密度测定试验:用电子天平测定茎秆第2节间的重量,根据茎秆的外径、壁厚以及节间长,计算其体积,重量/体积即为密度值。[结果]在小麦灌浆期,茎秆基部弹性模量、惯性矩、抗弯刚度及密度在品种间存在显著差异(P<0.05),弯曲强度及含水率在品种间无显著差异(P>0.05);且其基部第2节间的弹性模量、弯曲强度、抗弯刚度与密度呈正相关关系,与含水率呈负相关关系。茎秆密度值越大、含水率越低,抗弯刚度值、弯曲强度值越大,茎秆越不易倒伏。[结论]该研究结果为小麦的高产栽培、抗倒伏研究提供了参考依据。
2009年05期 v.10 100-101页 [查看摘要][在线阅读][下载 115K] [下载次数:152 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:8 ] |[阅读次数:49 ]
- 张文会;王明卓;苗秀莲;张玉霞;李宝娟;
[目的]研究短时间不同剂量UV-B辐射对冬小麦幼苗叶片生理指标的影响,为进一步研究植物应答短时间紫外线照射的机理提供参考。[方法]以冬小麦为试验材料,采用15和30μW/cm2的UV-B照射强度对冬小麦幼苗进行短时间照射处理。测定指标包括:①反射光谱值。用Unispec光谱仪测定反射光谱,并计算所得参数,评价UV-B处理前后叶片叶绿素、花色素苷、类胡萝卜素含量、水分含量以及光合强度的变化,每处理测定10片叶;②可溶性蛋白含量。采用考马斯亮蓝G-250法测定叶片的可溶性蛋白含量,牛血清蛋白作为对照;③荧光参数(Fv/Fm):将待测叶片暗反应20min后,用OS-30P荧光仪测定部位同叶色,每处理测定5片叶;④相对电导率。采用Martineau等的方法测定;⑤丙二醛(MDA):采用邹琦的方法测定。测定项目②~⑤均重复5次。[结果]UV-B处理导致叶绿素、可溶性蛋白含量以及含水量都降低,且存在剂量效应,30μW/cm2的降幅大于15μW/cm2;UV-B辐射导致花色素苷和类黄酮含量下降,尤其是处理后2h下降幅度最大,2种剂量的UV-B处理间差异不大。随着处理时间的延长,花色素苷含量呈逐渐上升趋势,其中,30μW/cm2处理的略高于15μW/cm2处理。UV-B辐射处理对类胡萝卜素含量的影响与花青素相同,均表现为先下降后上升的趋势,2种剂量间差异不大;2种剂量的UV-B处理均抑制了PSⅡ的电子传递,尤其是处理2h的抑制作用最大,4、6和8h的抑制有所缓解,且存在剂量效应;2种剂量的UV-B辐射均抑制了叶片的光合速率,随着照射时间的延长抑制效应加大;MDA和相对电导率在照射2h后明显增加,说明高剂量的UV-B处理对膜系统的损伤较大,低剂量的UV-B处理结果不明显。[结论]短时间的UV-B辐射处理对冬小麦幼苗叶片的影响具有剂量效应,高剂量比低剂量的作用效果大。且随着处理时间的延长,受害程度有所减轻,该结果与长时间UV-B照射的结果不同。
2009年05期 v.10 18-21页 [查看摘要][在线阅读][下载 400K] [下载次数:137 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:14 ] |[阅读次数:70 ] - 冯亮英;董喜存;李文建;马晓琪;马爽;余丽霞;李岩;刘清芳;何金玉;曲颖;
[目的]研究辐射能量为100MeV/u时不同剂量的碳离子辐照对2个甜高粱品种的种子萌发及几种酶活性的影响,为甜高粱品种的选育提供理论依据。[方法]对2个甜高粱品种雷伊和BJ0601种子进行辐射处理,能量为100MeV/u,辐射剂量分别为40、80、120、160和200Gy。甜高粱种子萌发后,统计发芽势和成苗率,并测定幼苗叶片中过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性。[结果]随着剂量的增加,发芽势先升后降,而成苗率逐渐下降,呈"类肩形",发芽势和成苗率均为40Gy>80Gy>CK>120Gy>160Gy>200Gy;GSH-Px、CAT、SOD及LDH酶活性的总体趋势是随着剂量的增加先升后降,不同酶略有不同。GSH-PX活性,雷伊在160Gy和200Gy处活性达最大,而BJ0601在40Gy处活性达最大,这可能是因为雷伊的耐受能力较强。雷伊GSH-PX最大活性是对照的1.28倍,BJ0601是对照的1.30倍。CAT活性在160Gy处达最大,其中雷伊是对照的4.42倍(P(0.05),BJ0601是对照的2.13倍。SOD活性,雷伊在40Gy处活性最大,是对照的1.3倍;BJ0601在40Gy和120Gy处活性最大,是对照的1.2倍。LDH活性随着剂量增大而降低,而后又上升,有一个低峰位置,其中雷伊在120Gy处,BJ0601在80Gy处。BJ0601的酶活变化趋势较雷伊变化明显,且二者酶活都小于对照。这可能是LDH对辐射比较敏感,受到的损害较大的缘故。[结论]低剂量辐射促进了种子萌发,使酶的活性维持在较高的水平;高剂量时酶活下降,会抑制甜高粱的生长。
2009年05期 v.10 22-25页 [查看摘要][在线阅读][下载 447K] [下载次数:136 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:16 ] |[阅读次数:49 ] - 胡长庆;张黎琳;黄美颖;熊尚凌;
[目的]研究基材物理性质对白腐真菌菌丝体生长的影响,为进一步扩大白腐真菌的应用范围提供理论基础。[方法]将粒度范围在<0.25mm、0.25~1.00mm和>1.00mm的3种木粉分别与鸡粪(粒度0.25~1.00mm)按质量比1:3的比例混合,用蒸馏水将含水率分别调整至50%、55%、60%、65%、70%、75%和80%,制成木粉鸡粪培养基。在平面和试管木粉鸡粪培养基中培养4种常见白腐真菌(黄孢原毛平革菌、香菇、平菇、凤尾菇),研究白腐真菌菌丝体生长与培养基材物理性质的相互关系。木粉的比重、空隙率、保水度和透水性根据SakaeHorisawa等的方法进行测定。木粉鸡粪培养基脱水率根据SadatoshiMeguro等的方法进行测定。[结果]培养基材粒度越大,比重越小,空隙率越大,基材保水能力越弱,配制成培养基后,在相同水分条件下,培养基脱水率越大。培养基材物理性质的差异首先影响的是培养基保持水分的能力,同时由于不同白腐真菌对于水分多寡的敏感程度的差异(黄孢原毛平革菌和香菇利用水分的能力较强,对于培养基水分的多寡较为敏感;而凤尾菇和平菇利用水分的能力较弱,需要较为优越的培养基水分条件),最终培养基材的物理性质对白腐真菌菌丝体的生长产生了显著影响。培养基材的各物理性质,包括粒度、比重、空隙率、保水度、透水性等通过影响培养基的水分和通气条件,与白腐真菌菌丝体生长之间形成反馈关系。培养基水分条件和通气条件分别与白腐真菌菌丝体生长存在正反馈关系,但是培养基水分条件与通气条件之间形成的却是负反馈的关系。三者共同构成了影响白腐真菌菌丝体生长的核心负反馈。培养基的含水率和木粉粒度在培养基材物理性质与白腐真菌菌丝体生长的反馈关系中只是作为外在辅助变量产生间接的影响。[结论]该试验确认了培养基材各种物理性质对白腐真菌菌丝体生长产生了显著的影响,并初步推断了其影响方式和途径。
2009年05期 v.10 26-29页 [查看摘要][在线阅读][下载 348K] [下载次数:82 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:8 ] |[阅读次数:59 ] - 何军;李晓莺;叶力勤;曹有龙;
分别于2008年的6月22日、7月11日、8月5日、10月12日(其中6~8月为夏果期,10月为秋果期),按3个处理(采收机采收,T1、T2、T3振动强度依次增大)和对照(熟练工人工采摘)分别采收枸杞,研究枸杞采收机不同振动强度采收对枸杞树的光合系统参数的影响。结果表明:对照和各处理的净光合速率(Pn)变化规律为7月中旬以前逐渐降低,7月中旬达到最低点,此后开始上升,至8月份达到一个新的高度,随后又开始下降,与枸杞树物候期分析结果一致。蒸腾速率(Tr)、气孔导度(Gs)的变化趋势与Pn一致。6~8月胞间CO2浓度(Ci)的变化趋势与Pn一致,但在10月明显升高。方差分析表明,各处理在各测定时期的Pn、Tr、Gs、Ci与对照相比差异不显著,说明采收机采收对枸杞树叶片的光合系统参数没有显著影响。光合系统参数的相关性分析表明,Pn和Gs、Tr具有较强的相关性,同时Gs和Pn、Tr也具有较强的相关性,说明光合速率和蒸腾速率的高低受气孔影响很大。在6~8月,Pn和Ci具有较强的正相关性,与气孔限制值Ls(Ls=1-Ci/Ca,Ca为空气中CO2浓度)有较强的负相关关系。夏果期(7月16日)光合速率的降低伴随着胞间CO2浓度的降低和气孔限制值的增大,光合速率的下降为气孔因素。秋果期(10月14日)光合速率降低,而胞间CO2浓度升高,表明光合速率降低为非气孔因素,是叶片的光合功能下降所致。
2009年05期 v.10 52-54页 [查看摘要][在线阅读][下载 251K] [下载次数:130 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:10 ] |[阅读次数:37 ]
- 王敏;那冬晨;姬虎太;张定一;
[目的]寻求少量、快速提取小麦幼叶DNA的方法。[方法]以小麦幼叶(只要是健康的绿叶,老叶也可)为试验材料,用改良的CTAB法小量快速提取转基因小麦总DNA。具体步骤为:①直接用已灭菌的1.5ml离心管夹取小麦叶片(无需称量),然后在液氮中快速冷冻后用玻璃棒研磨成细粉(研磨直接在离心管中进行,不必先在研钵中研磨然后再转移到离心管里,能够有效减少材料损失),加入600μl预热(65℃)的2%CTAB提取缓冲液,快速振荡摇匀。置于65℃的水浴锅中温育30min,期间温和混匀几次。②取出离心管,冷却至室温,加入600μl氯仿:异戊醇(24:1)充分混匀,于4℃下12000r/min离心8min(只抽提1次)。③取上清,加入等体积预冷的异丙醇,缓慢混匀,至有絮状DNA析出,-20℃放置30min以上。④4℃下12000r/min离心8min。弃上清液,将沉淀用700μl70%乙醇清洗2次,离心,弃乙醇,室温下挥发乙醇,加入适量ddH2O或0.1×TE溶解沉淀(DNA),-20℃保存。所提取的DNA以0.8%琼脂糖凝胶电泳检测。[结果]改良的CTAB法提取小麦基因组DNA所提取的DNA纯度高、无降解现象,适用于进行常规PCR扩增,并且需要材料量少、成本低,还可缩短操作周期、节省时间。[结论]该研究为小麦DNA的提取提供了一种所需材料量少、简便、快速的方法。
2009年05期 v.10 34-35+75页 [查看摘要][在线阅读][下载 220K] [下载次数:187 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:26 ] |[阅读次数:72 ] - 王振东;王晓华;孟鹏;秦会权;郑新伟;刘芳普;薛立江;张敏;
[目的]研究了植物病毒表达载体pClYVV/CP/W的构建及用pClYVV/CP/W表达绿色荧光蛋白(GFP),为植物反应器生产有用蛋白、开发有效的植物病毒载体提供参考。[方法]用三叶草黄脉病毒侵染性全长cDNA克隆pClYVV基因组的NIb/CP基因之间的一段多克隆位点和两侧含有病毒蛋白酶NIa切割识别序列的多聚脱氧核糖核苷酸接头,构建pClYVV/CP/W载体,并将绿色荧光蛋白基因插入pClYVV/CP/W中构建pClYVV/CP/W/GFP载体,用反转录PCR对重组病毒克隆转录情况进行检测,并用Western杂交对重组病毒克隆表达的目的基因产物进行测定。[结果]pClYVV/CP/W/GFP接种的蚕豆幼苗表现出与野生型ClYVV相同的症状,发病率达100%,表明重组病毒克隆pClYVV/CP/W/GFP有侵染性,外源基因的插入没有破坏载体pClYVV/CP/W的开放阅读框;以感染叶总RNA为模板,对pClYVV/CP/W/GFP表达GFP外源基因的稳定性进行了检测,从F0(重组病毒质粒最初转录出的病毒)一直检测到F4子代病毒。检测结果表明,外源基因在F4子代病毒基因组中稳定存在;以从感染叶中提取的总蛋白为抗原,以GFP抗体为第1抗体,以碱性磷酸酶标记抗体为第2抗体,用Western杂交对重组病毒克隆pCVYVV/CP/W/GFP表达外源蛋白进行了定性检测。从F0一直检测到F4子代病毒。检测结果表明,重组病毒克隆pClYVV/CP/W/GFP至少到F4子代病毒能稳定表达GFP。[结论]该研究结果为用植物表达有用蛋白提供了有用的植物病毒载体。
2009年05期 v.10 38-41+48页 [查看摘要][在线阅读][下载 491K] [下载次数:188 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:60 ] - 姜丽萍;祝啸先;游存厚;乌日古木拉;王芳;张文娟;刘德斌;杜晨光;李海军;包福祥;赵鹏伟;鲍庆江;曹贵方;
[目的]探讨ghrelin对蒙古绵羊脐静脉内皮细胞的血管内皮生长因子VEGF及其受体Flt-1mRNA表达的影响。[方法]试验分为4组:I组,空白对照组;II组,脂质体组(不加寡核苷酸);III组(SCON),20μmol/L正义寡核苷酸组;IV组(ASCON),20μmol/L反义寡核苷酸组。上述各组均在培养24、36、48h后,采用实时荧光定量方法检测VEGF及其受体Flt-1mRNA表达情况的变化。[结果]VEGF和Flt-1熔解曲线表明扩增效果好,培养24h,VEGFmRNAI组相对表达量为0.0769,II组为0.0768,III组为0.0769,3组之间无显著性差异(P>0.05),IV组VEGFmRNA相对表达量下降为0.0242,且与I、II、III组有显著性差异(P<0.05)。培养36h,前3组相对表达量分别为0.059,0.051,0.0514,3组之间无显著性差异(P>0.05),第IV组为0.0242,与前3组比较有显著性差异(P<0.05)。培养48h,前3组相对表达量分别为0.061,0.0552,0.0521,3组之间无显著性差异(P<0.05),第IV组为0.0115,与前3组比较有显著性差异(P<0.05)。培养24h,Flt-1mRNAI组相对表达量为0.0786;II组为0.0782,III组为0.0781,3组之间无显著性差异(P>0.05),IV组Flt-1mR-NA相对表达量下降为0.0256,且与I、II、III组有显著性差异(P<0.05)。培养36h,前3组相对表达量分别为0.0781,0.0784,0.0782,3组之间无显著性差异(P>0.05),第IV组为0.0228,与前3组比较有显著性差异(P<0.05)。培养48h,前3组相对表达量分别为0.0691,0.0780,0.0693,3组之间无显著性差异(P>0.05),第IV组为0.0215,与前3组比较有显著性差异(P<0.05)。可见,VEGF受体Flt-1mRNA的表达与VEGF相似。二者均在I组、II组表达量无差异,具有较高的表达量,随着时间的延长没有明显变化;在III组表达轻微下降,但与I组和II组无显著性差异(P>0.05);IV组的表达量显著下降(P<0.05),并且随着时间的延长至逐渐下降。[结论]反义抑制ghrelin对VEGF及其受体Flt-1的mRNA表达有下调作用。
2009年05期 v.10 45-48页 [查看摘要][在线阅读][下载 303K] [下载次数:37 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:79 ] - 姜云天;陈艳秋;顾地周;李玉梅;曲柏宏;
[目的]建立短果杜鹃高效快繁体系,实现短果杜鹃的高效离体快繁。[方法]以短果杜鹃嫩茎段为外植体,选用U10(108)均匀表,考察IAA、IBA、NAA和GA3浓度交叉配比对短果杜鹃腋芽生长伸长及生根的影响,筛选最适合短果杜鹃腋芽萌发生长及生根的培养基。继代快繁采取节培法。[结果]最适合嫩茎段的腋芽萌发生长及生根的最佳培养基为MS(改良)+IAA0.15mg/L+IBA0.30mg/L+GA33.00mg/L,再生率达92%以上。以再生植株的茎节为材料进行快繁的结果表明,在35d的1个培养周期内增殖倍数平均达45以上。待苗根长至2.0cm以上时,从培养瓶中取出试管苗,在含有5.00mg/L杀毒矾溶液中洗去苗上残留的琼脂,然后将苗植入经20倍杀毒矾消毒过的腐烂松针、泥炭土和细河砂混合(比例为2:2:1)的基质中,用透光好的塑料薄膜覆盖以保湿保温,湿度保持在75%,温度控制在(18±2)℃,每天自然光照8h,每天中午通风换气10min。10d后揭去薄膜,每天早晚喷洒清水各1次。采用上述炼苗和移栽方法,短果杜鹃试管苗的成活率达95%以上。[结论]该研究建立了短果杜鹃的高效快繁体系,为长白山高山杜鹃的开发利用和工厂化育苗提供了依据。
2009年05期 v.10 49-51页 [查看摘要][在线阅读][下载 258K] [下载次数:72 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:47 ] - 章振华;于博;姜北宇;钱爱东;李林;景小冬;张建伟;
[目的]测定H9N2AIV4个毒株血凝素基因序列,并进行比较分析,从分子生物学角度了解各毒株间的差异和变异规律,进而了解该亚型禽流感的分布及流行规律。[方法]参照H9N2亚型禽流感HA基因序列设计1对引物,对禽流感A/Chicken/Hebei/WD/98(H9N2)、A/Chiken/Hebei/ZD/04(H9N2)、A/Chicken/Beijing/MY/06(H9N2)和A/Chicken/Beijing/PG/08(H9N2)4个毒株HA基因进行扩增、克隆和测序,并将这4个毒株的HA基因序列分别与GenBank登录的10个H9N2亚型禽流感毒株(序列号分别为AF156376,AF156377,AF156378,AF461517,AF461519,AF461521,AF461530,AY364228,AY862606,D90305)进行比较分析,并绘制进化树。[结果]4个毒株HA基因(ORF)全长1683bp,编码561个氨基酸;4个毒株之间的核苷酸和氨基酸同源性分别为92.5%~95.6%和95.2%~96.8%,其中MY株和ZD株HA基因同源性和氨基酸同源性均为最高;WD株、MY株、PG株和ZD株与其他10个毒株的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为82.6%~95.1%、83.0%~99.0%、82.7%~95.5%和81.30%~95.7%、86.6%~96.3%、86.6%~97.9%、87.0%~97.1%、86.9%~97.3%,遗传进化树分析表明,H9N2的HA基因的进化树有2个大的分支,分为2个种系:欧亚种系和北美种系。欧亚种系又分为3个群系,分别以A/Quail/HongKong/G1/97(AF156378),A/Duck/HongKong/Y439/97(AF156377)和A/Duck/HongKong/Y280/97(AF156376)为代表株,将这4个分离株与国内一些参考株、韩国代表株(AY862606)以及上述欧亚种系代表株的HA基因序列进行比较。结果表明,MY株、WD株、PG株和ZD株均属于欧亚种系,并且都属于A/Duck/HongKong/Y280/97群系,与国内参考株的亲缘关系都较近,而MY株与A/Chicken/Shandong/2/99(AF461521)亲缘关系最近。PG株与A/Chicken/Liaoning/2/00(AF461519)的亲缘关系最近,氨基酸同源性达到97%。ZD株与A/Chicken/Beijing/1/97(AF461530)的亲缘关系最近,核苷酸和氨基酸的同源性都是最高的,分别达95.7%、97.3%。韩国株(AY862606)则属于A/Duck/HongKong/Y439/97(AF156377)群系。总体来看,这4个分离株与国内参考株亲缘关系较近,而与韩国株(AF156377)较远。4个分离株除WD株的HA基因裂解位点为PSRSSR/GLF,MY、PG和ZD株的HA基因裂解位点均为PARSSR/GLF,WD株裂解位点附近的A变为S,也就是由丙氨酸变为丝氨酸,S也是非碱性氨基酸,因此,致病力没有变化,这4个分离株均为低致病性禽流感病毒。HA基因的几个受体位点分别为109aa,161aa,163aa,191aa,198aa,202aa,203aa,通过比较除了PG株的198aa为丙氨酸(Ala),其他3个都为缬氨酸(Vla)。编码198aa的3个碱基由GTG突变为GCG,其他参考株的198aa变异性也较大,A/Duck/HongKong/Y439/97(AF156377)和A/Quail/HongKong/G1/97(AF156378)的198aa都是谷氨酸(Glu),还有的国内株为T。这4个分离株的其他几个受体结合位点的氨基酸都是一样的,然而,通过对10个参考株的比较发现,191aa也容易发生变异,有的变为组氨酸(His)。202aa和203aa在所有的毒株中都比较保守。[结论]HA基因在不同毒株间具有很高的同源性。但有很多因素能够影响其HA基因的变异,从而影响其致病力,这与地域因素有很大的相关性,因此,应加强地域间的防控。
2009年05期 v.10 55-58+64页 [查看摘要][在线阅读][下载 743K] [下载次数:168 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:5 ] |[阅读次数:69 ] - 王海波;施晓东;张梅芬;郭俊云;
利用紫花苜蓿蛋白质二硫键异构酶(mPDI)的mRNA(来自NCBI,登录号为Z11499.1)及氨基酸序列(来自UniProtKB/Swiss-Prot数据库及NCBI数据库,其登录号分别为P29828、CAA77575.1),应用生物信息学软件预测了该蛋白质的理化性质、亲疏水性、信号肽、二级结构、卷曲螺旋结构、跨膜区域、糖基化位点、活性位点、亚细胞定位、功能结构域及高级结构。结果表明:紫花苜蓿mPDI蛋白质是一个整体疏水性蛋白,细胞定位为粗面内质网,含有512个氨基酸,理论等电点为4.98,分子量为57087.4Da,原子组成为C2597H3977N651O786S6,摩尔消光系数在280nm处为37610,不稳定系数为40.12,脂肪系数为79.96,总平均亲水性为-0.357。该蛋白质由20种氨基酸组成,其中非极性R基团氨基酸占44.3%,极性R基团氨基酸占28.4%,酸性氨基酸占13.6%,碱性氨基酸占13.1%,Lys、Glu、Val、Ala含量最为丰富,Met和Cys含量最少。信号肽位于1~24号氨基酸。利用ProtScale软件的KyteandDoolittle算法对mPDI蛋白进行亲/疏水性预测,结果表明该蛋白质含有7个高疏水性区域,分别分布在40~50区域、95~105区域、120~130区域、190~200区域、285~295区域、340~350区域以及365~375区域。利用SignalP网络工具对mPDI蛋白进行信号肽的预测,神经网络法显示第24~25位点是最可能的剪切点,马可夫模型显示了同样的信号肽酶切位点。mPDI蛋白质二级结构中α-螺旋占26.37%(135AA)、无规则卷曲占53.32%(273AA)、延伸链占20.31%(104AA);包含3个卷曲螺旋结构、3个糖基化位点(分别为143位的S、148位的T、461位的S)、2个硫氧还蛋白结构域(14~144位、357~485位)、2个硫氧还蛋白活性位点(54~72位、399~417位)、1个内质网靶向序列(509~512位);Ramachandram结构检测表明此模型的三维结构符合立体化学能量规则。
2009年05期 v.10 59-64页 [查看摘要][在线阅读][下载 1284K] [下载次数:212 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:23 ] |[阅读次数:87 ] - 王园;金志强;陈业渊;雷新涛;
[目的]构建我国芒果主要栽培品种的AFLP分子标记体系。[方法]供试31个芒果品种为:Banganapalli、台农1号、桂热10号、Carabao、NangKlang Wun、泰国506、紫花、Keitt、粤西1号、斯里兰卡811、龙井大芒、红象牙、小菲、泰国504、Spooner、R2E2、串芒、鹦鹉芒、Irwin、金煌、Kent、海豹、Haden、Dashehari、Neelum、桂香、Ono、白象牙、Bambaroo、Macheso、Zill。以粤西1号芒果幼嫩叶片为材料探索提取高质量DNA的方法,为了获得更高质量和数量的基因组DNA,对曾杰的方法进行了下列改良:A、用2%的CTAB提取液,其他不变;B、用3%的CTAB提取液,但在提取后只用氯仿异戊醇提取2次;C、用3%的CTAB提取液,但在提取后用氯仿异戊醇提取1次;D、用3%的CTAB提取液,但在提取后用酚氯仿异戊醇提取1次。用供试品种中的台农1号、Carabao、Keitt、Kent对64对引物组合进行筛选,其中8个EcoRI引物分别是E-AAC、E-AAG、E-ACA、E-ACT、E-ACC、E-ACG、E-AGC、E-AGG,8个MseI引物分别是M-CAA、M-CAC、M-CAG、M-CAT、M-CTA、M-CTC、M-CTG、M-CTT。利用AFLP分子标记在DNA水平上对芒果进行遗传多样性研究。[结果]4种方法提取的DNA较完整,均可得到明亮清晰的主带。且综合比较,用B方法(即采用较高浓度的提取液,提取后用氯仿异戊醇提取2次)可获得高质量、高纯度DNA,可用于芒果AFLP标记分析。供试64对引物组合中适用于芒果种质资源AFLP分析的引物组合共14对,分别是E-ACC/M-CAC、E-AAC/M-CAT、E-AAG/M-CAC、E-AAG/M-CAT、E-ACA/M-CAC、E-ACA/M-CAG、E-ACA/M-CAT、E-ACA/M-CTA、E-ACT/M-CAC、E-ACC/M-CTC、E-ACC/M-CTG、E-AGC/M-CAG、E-AGC/M-CTA、E-AGC/M-CTC。这14对引物组合在31份芒果种质中共扩增出1761条带,其中多样性带比例为97%。平均每对引物产生125.8条带和121.6条多样性带。14对引物均可将上述31个品种完全区别开来,其中E-ACA/M-CAT和E-AGC/M-CTC引物组合多态性最大,达100%,可用于芒果品种指纹图谱构建。[结论]利用AFLP可以高效检测芒果种质资源分子标记多样性。
2009年05期 v.10 72-75页 [查看摘要][在线阅读][下载 341K] [下载次数:161 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:6 ] |[阅读次数:49 ] - 曹果清;莫清珊;陈凤仙;
[目的]对组织DNA提取方法进行改进,建立一种从绵羊凝血块中提取基因组DNA的方法。[方法]将绵羊凝血块用眼科剪剪碎,用组织DNA抽提液裂解细胞,用蛋白酶K消化后,经过酚/氯仿抽提,无水乙醇沉淀获得基因组DNA。用NanoDrop ND-1000微型分光光度计检测DNA浓度和纯度。用0.8%琼脂糖凝胶电泳检验基因组DNA的完整性。以绵羊微卫星位点BM203为扩增位点,分别以F:5′-GGGTGTGACATTTTGTTCCC-3′,R:5′-CTGCTCGCCACTAGTCCTTC-3′为上下游引物,进行PCR扩增试验。PCR产物用1.5%琼脂糖凝胶电泳检测。[结果]提取的DNA浓度为(159.90±0.70)ng/μl,A260/A280比值为1.80±0.01,分子完整,结果理想。以从凝血块中提取的DNA为模板,对绵羊BM203微卫星位点进行了PCR扩增,扩增产物条带整齐、明亮、特导性强,扩增效果好。[结论]该方法简单、实用,提取的DNA可满足后续相关研究对DNA质量的要求,值得推广借鉴。
2009年05期 v.10 76-78页 [查看摘要][在线阅读][下载 252K] [下载次数:152 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:56 ] - 高闪电;独军政;常惠芸;丛国正;邵军军;林彤;宋帅;谢庆阁;
[目的]为C型FMDV型特异性多克隆抗体、单克隆抗体的制备和FMDV定型提供理论依据。[方法]以含有C型口蹄疫病毒(FMDV)结构蛋白基因VP1的重组质粒pGEM-CP1为模板,设计特异性表达引物,扩增VP1及其C端编码区。对C型口蹄疫病毒VP1及其C端进行原核表达,并测定反应原性。利用纯化的C型VP1及其C端融合蛋白建立间接ELISA,分别对O、A、C、Asia1四型豚鼠阳性血清进行检测,确定C型VP1及其C端与其他3型FMDV抗体的型间交叉反应性。[结果]构建了pPRO-CVP1、pPRO-CVP1c重组原核表达质粒,实现了C型口蹄疫病毒VP1及其C端的高效表达,目的蛋白的分子量大小分别为33kD和20kD。Western blot显示,VP1及其C端融合蛋白均可与对应血清型的豚鼠阳性血清反应。C型VP1及其C端与其他血清型的FMDV阳性血清均未发生交叉反应,且以VP1C端的型特异性最好。[结论]获得了C型FMDV特异性抗原。
2009年05期 v.10 79-81+95页 [查看摘要][在线阅读][下载 365K] [下载次数:70 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:72 ] - 成瑜;刘昭军;刘丽艳;李铁;赵曦;
[目的]构建以甘露糖为筛选剂的抗旱、抗盐碱植物表达载体,进一步选育无标记的抗逆作物品种。[方法]利用腊梅花水通道蛋白CpTIPcDNA和大肠杆菌pmi基因构建植物表达载体,将抗逆基因与甘露糖正向选择系统结合。pmi基因植物表达载体(pPMI)的构建:用XhoⅠ酶切植物表达载体pCAMBIA2301,切除Kan基因,并用CIP酶进行去磷酸化,然后与XhoⅠ酶切后PCR产物连接转化。腊梅花水通道蛋白CpTIP基因甘露糖筛选体系植物表达载体(pPMI::CpTIP)的构建:用KpnⅠ和XbaⅠ酶切pPMI植物表达载体和克隆载体,并将酶切后pmi植物表达载体与腊梅花水通道蛋白CpTIP基因连接转化。转化鉴定均按Sambrook等的方法进行。[结果]成功构建了腊梅花水通道蛋白CpTIP基因甘露糖筛选体系植物表达载体pPMI::CpTIP。[结论]所构建的载体结合了抗逆基因和甘露糖正向选择系统的优点,将抗逆基因与环境友好型筛选体系很好的结合起来。
2009年05期 v.10 82-84页 [查看摘要][在线阅读][下载 340K] [下载次数:97 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:47 ] - 庞秋香;庞书香;赵博生;陈艳艳;张萌;
应用聚丙烯酰胺凝胶电泳结合生化染色方法分别对雌雄泰山赤鳞鱼10种组织中苹果酸酶同工酶酶谱进行分析。结果表明,在所取的10种组织中,雌性泰山赤鳞鱼在心脏、性腺、肾、眼、鳃和脾6种组织中存在苹果酸酶,而雄性泰山赤鳞鱼只在心、肌肉、性腺、眼和鳃5种组织中存在苹果酸酶。雌性鱼心脏组织中只有1条ME-2带,而雄性鱼心脏组织含有ME-1和ME-22条酶带;卵巢中含有ME-1和ME-22条酶带,而精巢中只含有ME-11条带;雌性鱼的眼组织含有ME-1带,而雄性鱼眼中含有ME-2带。肾和脾组织只在雌性鱼中含有苹果酸酶酶带,而肌肉组织只在雄性鱼中含有苹果酸酶。苹果酸酶的表型在泰山赤鳞鱼不同性别同一组织和同一性别不同组织之间都存在明显差异,但在同一性别的不同个体之间不存在差异。该研究结果为赤鳞鱼种群的发育遗传学、品种改良和定向育种提供了基础资料,为赤鳞鱼的开发和保护奠定基础。
2009年05期 v.10 85-87+99页 [查看摘要][在线阅读][下载 337K] [下载次数:84 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:6 ] |[阅读次数:54 ] - 尹国友;孙婕;苏景;陈兰英;赵祯;
[目的]分析猪繁殖与呼吸综合症(PRRS)发病原因、流行趋势,为预防和控制PRRSV提供理论依据。[方法]根据GenBank上的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ATCCVR-2332的全基因序列,设计并合成引物,采用RT-PCR技术扩增了7株流行株(HLJ10,HLJ48,HLJ64,HLJ76,HLJ77,HLJ85,HLJ87)中的ORF5基因序列。应用DNAStar软件分析所测序列,并与ATCCVR-2332、CH-1a、BJ-4、LV及疫苗株MLV进行序列比较。同时用系统进化树分析了分离株之间的亲缘关系。[结果]核苷酸序列分析表明这7株流行株中ORF5基因与VR-2332、CH-1a、BJ-4等代表株的同源性分别为88.1%~98.8%,89.9%~95.2%,85.6%~98.7%;与LV的同源性为54.7%~56.9%。氨基酸序列分析表明这7株流行株与VR-2332、CH-1a、BJ-4等代表株的同源性分别为88.1%~96.8%,88.1%~94.5%,86.1%~96.5%;与LV的同源性为54.7%~56.2%。通过系统发育进化树分析可知HLJ48、HLJ64、HLJ76、HLJ77、HLJ85与CH-1株亲缘关系密切,同属一亚群,表明所获得的毒株与参考株CH-1亲缘关系较近,可能由CH-1演化而来。HLJ10、HLJ87与疫苗株MLV关系较近,而且HLJ10、HLJ87的同源性高达100%,可能由于使用疫苗而感染,说明黑龙江省存在疫苗毒的隐性感染。[结论]流行株在ORF基因区域的变异较大,同一地域分离株间ORF基因序列同源性较高且亲缘关系较近,不同地域则较远。
2009年05期 v.10 88-91页 [查看摘要][在线阅读][下载 733K] [下载次数:49 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:5 ] |[阅读次数:62 ] - 桂腾琴;乔爱民;孙敏;王心燕;吴和原;
利用ISSR技术分析39份果梅种质资源多样性和亲缘关系。结果表明,从51条引物中筛选出10条分辨率强的引物,共扩增出120个位点,平均每个引物扩增出12个位点,最多为16(UBC834),最少为10(UBC857),其中,多态性条带98条,多态性比率(PPB)为81.67%,表明ISSR标记在检测果梅基因组遗传多态性上有较显著的检出效率。DNA片段大小分布在0.2~3.0kb。基于各材料的Jaccard系数,利用UPGMA法进行聚类分析构建亲缘关系树状图。各材料之间的亲缘关系较复杂,并非平行分化的关系。39份供试材料的相似系数为0.5263~0.9910,其中,相似系数最大的为浙江的白毛和肖山选,达0.9910,属于青梅类,表明两者的亲缘关系最近;相似系数最小的为广东的矮白梅和湖南的红梅二号,仅为0.5263,表明两者的遗传差异较大。以0.65为阈值将39份材料分为3个类,第Ⅰ类为矮白梅一个品种,该品种因其树形矮化,适熟时果皮呈均匀的浅绿色,无红晕,梅果含酸量高等特征独立于其他品种之外,可能是一份比较特殊的种质资源;第Ⅱ类包括4个品种,白毛、肖山选、红梅2号和木瓜梅,其余的34个品种为第Ⅲ类。在第Ⅲ类的34个品种中,以0.71水平值又可以分为5个亚类,第1亚类(ⅢA)包括21个品种,可再分成5个组:第1组(a)包括大叶青、桐绿四号、石庵白粒圆、三排早、中脂梅、核梅、腊梅、新白梅等8个品种,除中脂梅和腊梅外,其余的6个品种属于青梅类;第2组(b)包括软枝大粒梅、大沛梅2号、大青梅、三排选一、山溪选一、软枝乌叶梅、大沛梅10号和白粉梅等8个品种,除三排选一、山溪选一属于青梅类外,其余的6个品种属于红梅类;第3组(c)包括竹梅和沙梅;第4组(d)包括白梅和桃梅,都属于红梅类;第5组(e)包括1个品种,沅江青梅。第2亚类(ⅢB)包括9个品种,皇后梅、胭腊梅、青水梅、大横核、横核、天水梅、双水梅、白头鹰和红面梅,除皇后梅、胭腊梅、红面梅属于红梅类,其余的6个品种属于青梅类。第3亚类为(ⅢC)大核青。第4亚类(ⅢD)为鸳鸯梅和红花梅。第5亚类(ⅢE)是李梅。供试材料间的聚类结果与传统园艺学分类基本一致,表明供试材料间的聚类与地域无明显相关性。
2009年05期 v.10 92-95页 [查看摘要][在线阅读][下载 421K] [下载次数:141 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:12 ] |[阅读次数:96 ]
- 廖菁;常国斌;徐琪;张依裕;张海波;周琼;陈国宏;
[目的]研究不同品种鸭在不同发育时期肌纤维的发育规律。[方法]采用电子显微镜观察相同条件下饲养10周的樱桃谷鸭、金定鸭、白羽番鸭、苏牧麻鸭(樱桃谷♂×金定♀)的胸肌肌纤维的超微结构,并测定肌原纤维的直径和肌节长度。[结果]随着日龄的增加,肌原纤维直径越来越粗;肌节长度及肌原纤维直径随日龄增长的变化差异不显著(P>0.05);白羽番鸭和金定鸭肌原纤维直径相对较粗,而樱桃谷鸭和苏麻鸭相对较细;苏麻鸭和白羽番鸭的肌节长度相对较长,而樱桃谷鸭和金定鸭的相对较短,揭示金定鸭和白羽番鸭肌肉嫩度比樱桃谷鸭和苏牧麻鸭高,肉质较嫩;各鸭品种肌纤维超微结构基本特征一致,肌纤维均含有较多的椭圆形细胞核,位于肌纤维的边缘,紧贴肌膜表面;肌浆内含有大量的肌原纤维,在肌原纤维之间分布有肌浆网、糖原颗粒、脂肪滴和丰富的线粒体;肌原纤维呈细丝状,直径1μm左右,沿纤维的长轴平行排列。[结论]该结果对鸭的选种及选育有着重要意义。
2009年05期 v.10 107-109页 [查看摘要][在线阅读][下载 623K] [下载次数:94 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:17 ] |[阅读次数:29 ] - 武彩红;张斌;郑筱峰;芮荣;戴建军;
[目的]探讨卵母细胞扫描电镜和透射电镜的制作方法,为相关研究提供技术支持。[方法]以猪GV期和体外成熟MII期卵母细胞(抽吸法采集)为研究对象。①扫描电镜样本制备:供试GV期和MII期卵母细胞于PBS(pH值7.4)中清洗后,部分转入0.1%透明质酸酶中,38.5℃孵育15min,微吸管吹打去除卵丘细胞(CC),即获得无卵丘细胞的卵母细胞,用以观察卵母细胞外透明带(ZP)结构;取去除卵丘细胞的部分卵母细胞,经PBS液洗后,再置于0.5%链霉蛋白酶中,在实体显微镜下观察,待透明带溶解时,小心地将卵母细胞转入PBS中,即获得了无透明带的卵母细胞,用以观察卵母细胞膜表面的微绒毛(Mv)。未去除卵丘细胞的卵母细胞、去除卵丘细胞的卵母细胞及去除透明带的卵母细胞分别经PBS洗2~4次后,于2.5%戊二醛中4℃固定6h,再经PBS清洗3次,每次30min;再于1%锇酸中固定1.5h,然后再经PBS清洗3次,每次30min;之后,用乙醇逐级(30%、50%、70%、90%、100%、100%)脱水,每级20min;样品脱水后,用乙酸异戊脂置换;置换后的样品直接移到样品台上,再放入临界点干燥仪干燥,粘台,IB-5离子溅射仪喷金,置于扫描电子显微镜下观察、拍照。②透射电镜样本制备:供试卵母细胞也经PBS清洗,戊二醛固定,琼脂包埋后锇酸固定,乙醇脱水,步骤基本同上,只是最后用环氧丙烷置换。脱水后的样品于Epon-812树脂和丙酮等体积混合液中渗透4h,再在纯Epon-812中渗透过夜;然后将样品包埋,放入聚合器中聚合(35℃,24h;45℃,24h;60℃,48h);聚合后的样品在实体显微镜下修块,半薄切片定位,重新包埋,LKB-V超薄切片机切片;超薄切片用醋酸双氧铀-柠檬酸铅双重染色,样品自然干燥后在透射电子显微镜下观察、拍照。[结果]电镜下观察到的细胞形态结构完好,超微结构清晰。扫描电镜下,GV期卵母细胞的卵丘细胞紧密包围在卵母细胞外,微绒毛呈致密状垂直于卵膜表面,透明带呈不规则的蜂窝状,有小梁突起。在体外成熟MII期卵母细胞中,卵丘细胞变得松散,卵母细胞表面的微绒毛结构显得更光滑,透明带呈不规则的蜂窝样,但蜂窝状结构增多,且小梁突起更明显。透射电镜下,GV期卵母细胞的卵丘细胞在透明带周围紧密排布,并有大量突起伸入透明带中;卵母细胞微绒毛数量较多、相对较长,且也伸入透明带中;线粒体呈圆形,多为横嵴并清晰,成簇分布于皮质区;脂滴以两种不同形式存在于大部分细胞质内,一种呈均质状,另一种不均质且有透亮条纹,两种形式的脂滴常相邻存在,并以均质脂滴居多。脂滴外包有不连续的滑面内质网;高尔基体发达,由多层扁平囊泡及大小泡组成;在MII期卵母细胞中,卵丘细胞间缝隙连接增大,出现了明显的卵周隙;与培养前卵母细胞相比,微绒毛相对较短、较粗,且从ZP内撤回;线粒体体积增大,仍成簇伴随着脂滴分布;脂滴仍以两种不同形式存在,但以不均质脂滴居多;不均质脂滴呈球状,且上透亮条纹增多,电子密度更高;皮质颗粒位于卵质膜下,呈单层排列。[结论]证实该方法适用于卵母细胞超微结构观察的制样,另外,此法也适用于休积小、数量少、游离细胞的电镜样本制备。
2009年05期 v.10 110-112+188页 [查看摘要][在线阅读][下载 690K] [下载次数:532 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:7 ] |[阅读次数:113 ] - 苗婷婷;魏世宝;
[目的]应用均匀设计对延边黄牛卵母细胞体外成熟及核移植后的卵裂体系进行优化。[方法]用抽吸法回收卵母细胞,在不同条件下进行卵母细胞的体外成熟培养,然后对成熟卵母细胞进行核移植、融合、激活以及胚胎的体外培养。采用均匀设计法,选用U10(103)均匀设计,比较了不同的卵巢保存温度、成熟培养时间以及卵泡直径大小对牛卵母细胞体外成熟率及卵裂率的影响。[结果]延边黄牛卵母细胞体外成熟的最佳条件为:在卵巢保存温度为26℃或31℃的条件下,选取直径为8.0mm的卵母细胞成熟培养24h;卵母细胞核移植后卵裂的最佳条件为:在卵巢保存温度为26℃的条件下,选取直径为6.0mm或8.0mm的卵母细胞培养24h。[结论]该结果对延边黄牛或其他种黄牛的育种及种群扩繁具有一定的参考意义。
2009年05期 v.10 113-115页 [查看摘要][在线阅读][下载 194K] [下载次数:36 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:5 ] |[阅读次数:64 ] - 朱壮春;陈阳;郝东升;王艳茹;马玉妹;曹向可;穆艮艮;李金坤;史相国;
[目的]建立一种用低龄日本大耳白兔制备高效价迟钝爱德华氏菌(Edwardsiella tarda,Et)免疫血清的方法。[方法]先制备迟钝爱德华氏菌(Et)抗原。用日本大耳白兔作免疫动物,分2组试验,一组是2月龄组(T组),另一组是6月龄(S组)。采取耳缘静脉注射的方法,小剂量连续多次(第1、7、14、21、27、33、41天时免疫剂量分别为0.2、0.2、0.25、0.2、0.25、0.3、0.4ml)免疫日本大耳白兔。免疫后,收集免疫血清,然后用微量凝集反应法分2次试血(第1次是免疫第33天后的第7天,采用1:20抗血清;第2次是免疫第41天时,采用1:40抗血清),测定免疫血清抗体效价。[结果]凝集反应显示,在免疫剂量相同的情况下,第1次试血测Et免疫血清效价,2月龄组T2血清效价最高为1:640,6月龄组S1、S2和S4血清效价均达1:1280,显示6月龄组的体液免疫应答反应强于2月龄组;经继续免疫8d后,第2次试血测Et免疫血清效价可见,2月龄组的T1、T2、T3和6月龄组的S1、S2、S4免疫血清效价一样,均高达1:5120。表明此时在接受相同剂量Et抗原刺激后,2月龄组和6月龄组的体液免疫应答反应已趋相同。[结论]试验中所采用的T组动物(日本大耳白兔)月龄较小,免疫后仍产生了与S组一致的高效价抗血清,说明用低龄日本大耳白兔制备高效价Et免疫血清的方法可行。
2009年05期 v.10 116-118页 [查看摘要][在线阅读][下载 191K] [下载次数:33 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:6 ] |[阅读次数:54 ] - 傅建军;王荣泉;刘峰;宣云峰;朱树人;李家乐;
[目的]研究杂交草鱼一龄阶段的生长和体型特点。[方法]建立长江自交YR(长江群体♀×长江群体♂)、珠江自交ZR(珠江群体♀×珠江群体♂)、杂交F1(长江群体♀×珠江群体♂)3个组合。为了避免前期生长差异对后期试验的影响,亲鱼催产至鱼苗下塘均同步进行,控制夏花培育过程养殖密度、养殖环境等条件保持一致;另一方面,到50日龄即对3个组合进行剪鳍标记同箱混养,克服不同网箱的影响。对3个组合鱼的生长和形态数据进行测量分析。体重(W)用电子天平测量,全长(TL)、体长(SL)、头长(HL)、体高(BH)和体宽(BW)用游标卡尺测量。绝对增重率AGR(g/d)=(W2-W1)/(t2-t1);超亲杂种优势HB(%)=(F1-BP)×100/BP。其中,AGR为50~170日龄的绝对增重率;W2-W1为饲养50~170d的体增重;t2-t1为两阶段的间隔天数;F1为杂交一代某性状的平均值;BP为优良亲本某性状的平均值。体型分析利用体长/全长、头长/全长、体高/体长及体宽/体长4个比例参数进行比较。[结果]体重、体长及绝对增重率均为F1>ZR>YR;体重、体长,在50日龄组合间差异不显著(P>0.05),在170日龄组合间差异均极显著(P<0.01);绝对增重率,F1分别比ZR、YR高20.00%、50.00%,F1与ZR差异不显著(P>0.05),与YR差异显著(P<0.05);F1在体重上表现明显的超亲杂种优势(20.09%)。3个组合间,体长/全长差异不显著(P>0.05),头长/全长、体高/体长及体宽/体长差异显著(P<0.05),F1表现头短、体高、体宽等特点。[结论]F1在生长性能和体型特征上均具有优势。
2009年05期 v.10 119-122页 [查看摘要][在线阅读][下载 273K] [下载次数:91 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:11 ] |[阅读次数:66 ]
- 邓祥征;韩健智;战金艳;赵永宏;
目前增加农田生态系统的碳储量的措施主要有:减少碳损失,包括提高能源利用率,减少水土流失和提高水肥利用率;增加土壤有机碳,包括调整耕作制度,使用有机肥料,应用深根作物和增加土壤中微团聚体的含量。在分析各种策略与措施的基础上,笔者认为以下几种农田碳汇管理措施有效且较容易推广。①实施土地用途转换管理:把低产及土壤退化严重的农田变成草地或森林;集约管理农田,实行农林复合、林草复合经营方式;在区域或地区尺度变单一土地利用方式为承担不同人类需要的多种土地利用方式等。②调整耕作制度:免耕不仅使土壤团聚体的数量和稳定性增加,从而减少了团聚体内部有机质的分解作用;还能有效地抑制土壤的过度通气,减少有机碳的氧化降解,防止土壤侵蚀;此外,免耕土壤有机碳的平均滞留时间比常规耕作土壤增加了约1倍。轮作能提高土壤固碳效率,在轮作中加入豆科作物或豆科牧草更可增加土壤有机质汇集,是实现土壤蓄存碳潜力的重要途径。提高复种指数,降低休耕频率可以提高作物产量并增加土壤作物残茬和根的有机质输入,从而增加土壤中有机碳的含量。③改善经营与管理:有机肥或有机肥和化肥配合施用,能显著提高土壤有机碳含量,应当优先选择;人为改变土壤的水分条件可以调节土壤排放温室气体的总量、组成及其产生的潜在温室效应;残茬和土壤有机质库的增加,可以改善植物的水分利用效率和营养再循环能力,减少养分流失,加强碳汇集。④依托技术进步:如改良作物品种,有计划地抓紧培育具有对高温、干旱等极端气候及病虫害有抗性的品种,确保在新的生态环境中产量不断提高,扩大碳的吸收存储。此外,采用新型节能的农机部件对拖拉机等农业动力机械进行改装,也可减少农田碳排放,增加农田碳汇的潜力。
2009年05期 v.10 134-139页 [查看摘要][在线阅读][下载 422K] [下载次数:534 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:14 ] |[阅读次数:127 ] - 敖子强;彭世寿;严重玲;杜静娜;叶娟;窦扬扬;
黔灵湖水质变坏的根源可以追溯到黔灵湖的上游小关湖,影响水质的根源是养猪废水,其中,主要污染物质为氮、磷、无机质、有机质和微生物等。在小关水库的下游建造人工湿地,种植的植物首先应选择一些去污力强,又宜于本土生长,根系发达,茎叶繁茂,具有耐污能力和抗寒能力、抗病虫能力强的植物,同时还应具有一定的观赏性。用人工湿地技术可以除去上游养猪废水和生活污水中的氮、磷、无机物质和有机物质等,将废水中的氮和磷转化为生物体组织中的氮和磷,从而减少了微生物的大量繁殖形成的"水华"导致黔灵湖水质变坏。同时,通过生物循环可获得一系列的生物产品(小关湖种植凤眼莲、浮萍等浮游植物可以为养猪提供饲料;在小关水库养殖的鱼、虾和贝等和在小关湖下游的湿地种植藕、菱、芡和茨菰等是富有营养的副食品;有些湿地动植物还可入药或作为发展轻工业的重要原材料),还可以美化黔灵公园,从而具有重要的教育意义和实用价值。
2009年05期 v.10 151-153+165页 [查看摘要][在线阅读][下载 288K] [下载次数:208 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:21 ] |[阅读次数:61 ] - 王宝申;王炳华;高树青;刘秀春;高艳敏;陈宝江;杨华;
[目的]弄清土壤污染的生物修复作用机理。[方法]通过果园田间试验和土壤模拟试验,研究施用果树生物有机肥对果园土壤中酶活性(土壤多酚氧化酶用邻苯三酚比色法测定,蔗糖酶用磷钼酸比色法测定,磷酸酶用磷酸苯二钠法测定,脲酶用靛酚比色法测定)、有害重金属的吸附-解吸作用、土壤微生物区系、有害病源菌数量的影响,以摸清施用果树生物有机肥对果园土壤生物修复的作用。[结果]生物有机肥提高了根域土壤多酚氧化酶、脲酶、磷酸酶的活力,提高幅度分别为0.4~0.7mg/g、0.09~0.12mg/g、0.4~0.5mg/g;降低了土壤蔗糖酶活性,降低幅度为0.4~0.8mg/g。生物有机肥促进了根域土壤对Pb2+等重金属的钝化。吸附曲线表明,生物有机肥、鸡粪对Pb2+的吸附量在溶液中Pb2+的初始浓度为200mg/L时达到最大(分别为61.7、24.7mg/kg),且生物有机肥对Pb2+的吸附量始终大于干鸡粪(高6.0%~20%);解吸曲线表明,生物肥、鸡粪在溶液中Pb2+初始浓度为600mg/L时,对Pb2+的释放量达到最大(分别为14.1、21.0mg/kg),且生物肥对Pb2+的解吸释放量始终低于干鸡粪(低3.1%~18.6%)。生物有机肥增加了有益真菌、放线菌、细菌等活性菌的数量,增幅分别为0.7~1.4倍、1.0~1.5倍、0.4~3.0倍,其中土壤硅酸盐细菌增加了0.15~3.50倍。生物有机肥降低了根腐病菌、疫腐病菌、白/紫纹羽病菌和线虫等有害生物的数量,其中,果园根域土壤白/紫纹羽病菌及白绢病菌的数量,施生物有机肥的平均比施用干鸡粪的下降了29.4%,比未施有机肥的下降了55.4%,经方差检验差异极显著。[结论]该研究为生物有机肥在果实上的推广应用提供了依据。
2009年05期 v.10 154-157页 [查看摘要][在线阅读][下载 426K] [下载次数:250 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:6 ] |[阅读次数:47 ] - 陈建;姚俊;白一力;郑建军;
[目的]研究厌氧+人工湿地对高负荷污水处理的能力。[方法]建设一组厌氧+垂直复合流小型人工湿地,湿地分为3级,呈阶梯状布局。湿地前端设置格栅、调节池及厌氧池等预处理构筑物。湿地建设面积25.20m2,采用直径1.00~2.00cm的砾石作为基质,基质填充高度为60.00cm左右;湿地植物采用风车草,平均植株高度在60cm左右,将根须栽入20.00cm的基质下。通过新式湿地对CODcr、溶解性磷酸盐(SP)、总磷(TP)和NH4+-N等常规污染物的去除研究其对污水处理的能力。系统全过程采用连续流方式,以90cm/d左右的水力负荷工况运行。试验分为2个阶段,从7月23日到8月22日为系统的启动阶段,系统的污染负荷较低;从8月23日到11月7日为系统的高负荷阶段,系统的污染负荷增高。[结果]采用90cm/d水力负荷运行时,厌氧+人工湿地处理技术对CODcr的去除率在夏秋季温度较高天气情况下可达70%~80%,可将300.00mg/L以上的CODcr浓度降到100.00mg/L以下,最佳运行(即进水CODcr浓度控制在200.00mg/L以下时,同时气温较高,植物生长较好时)甚至可以达到《城镇污水处理厂污染物排放标准(GB18918-2002)》一级B标准(60mg/L以下)。系统对磷的去除不如对有机物的去除理想,对氮的去除也不理想。对SP和NH4+-N的去除率在30%~40%。[结论]人工湿地的CODcr、SP及NH+-N浓度分别为300.00、2.50、15.00mg/L以下时,能达到较稳定的去除效率。
2009年05期 v.10 158-161页 [查看摘要][在线阅读][下载 750K] [下载次数:465 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:23 ] |[阅读次数:104 ] - 战金艳;史娜娜;吴红;邓祥征;
探索了一种基于自组织特征映射神经网络算法识别区域尺度生态系统服务功能分区的新方法。在此基础上,依据新千年生态系统评估框架构建了生态服务功能评价指标体系,并运用自组织特征映射神经网络算法开展了生态服务功能空间聚类分析,在1km栅格上识别并排定了各类生态服务功能的重要性。在案例区锡林郭勒盟的研究表明,利用基于自组织特征映射神经网络算法划分出的该区6个生态服务功能分区比较科学、合理,所形成的分区结论为案例区生态系统的可持续管理提供有时空针对性的决策参考信息。
2009年05期 v.10 162-165页 [查看摘要][在线阅读][下载 287K] [下载次数:303 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:21 ] |[阅读次数:63 ]
- 项诚;
采用1982~2006年我国年种植面积在6666.7hm2以上的小麦品种数据,从性状供给和需求2个方面对小麦品种演变情况进行分析。研究所涉及的小麦品种性状包括产量潜力、品质、抗病性、全生育期和株高。其中,产量潜力选取所研究品种的区试产量;品质为区试及相关机构对该品种粗蛋白含量的测试结果;抗病性选取条锈病、叶锈病、白粉病和赤霉病四大病害来分析,抗病性分为2级,即1为抗,2为不抗。研究所采用的供给性状是指当年农民生产上可供选择的所有品种性状指标平均值,用生产上所有6666.7hm2以上品种性状指标的简单平均值来表示;需求性状是指当年农民生产上所种植的所有品种性状指标的面积加权平均值,使用农民生产上种植的所有大于6666.7hm2的品种性状指标的面积加权平均值。结果表明:①我国农民生产上种植的小麦品种产量潜力以年均1.2%的速度增长,1982~2006年间全国小麦品种的产量潜力增加了44.7%,由1982年的4549kg/hm2,增长至2006年的6111kg/hm2。与此同时,农民对品种的产量性状需求仍是最主要的需求。所有年份面积加权平均产量潜力均大于简单平均产量潜力,1982~2006年间产量潜力的面积加权平均值年均增长率达1.3%,高于简单平均值。②我国农民生产上种植的小麦品种品质显著提高,1982~2006年间小麦品种粗蛋白含量提高了1.6个百分点。然而,农民对小麦品种粗蛋白性状的需求并未显示出与供给的显著差异,小麦品种粗蛋白含量的简单平均数和加权平均数并无显著差别。③我国农民生产上种植的小麦品种抗病性显著增强。20世纪80和90年代品种对条锈病、叶锈病、白粉病和赤霉病的抗性均显著提高,但2000年以后这些病害的抗性均未出现明显改善。而且,近年来农民生产上所种植的品种对抗病性的性状需求显著低于品种的性状供给。说明在不影响产量的情况下,农民对小麦品种抗病性的性状需求并不是最优先考虑的。④我国农民生产上种植的小麦品种生育期明显缩短,全国小麦品种的平均生育期由1982~1985年间的209d减少为2001~2006年的202d。但农民并未对品种生育期性状表现明显需求,各时期生育期性状的加权平均数均大于简单平均数。⑤农民生产上种植的小麦品种的株高明显降低,1982~2006年间全国小麦品种的平均株高降低了11.4cm。同时,农民对品种株高性状的需求仍然较大,各时间阶段小麦品种的面积加权平均株高均低于简单平均株高。
2009年05期 v.10 166-170页 [查看摘要][在线阅读][下载 478K] [下载次数:121 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:8 ] |[阅读次数:47 ] - 韩健智;邓祥征;战金艳;
实施必要的农田碳汇管理措施在减缓并应对全球气候变化的影响中发挥着积极的作用。在这种背景下,采用经济学上的生产函数来评价碳汇管理措施对农业生产的影响成为当前国内外学术界研究的热点问题之一。在全球气候变化的背景下,作为中国粮食主产区之一的华北平原,其农业生产明显受到气候变化的影响。从某种程度上看,华北平原农业生产的进一步发展将直接受制于气候变化及其与减缓气候变化效应密切相关的实施农田碳汇管理措施所产生的综合影响。该文以华北平原为案例区试验并测算了碳汇管理措施对农业生产的影响。研究结论对区域水平实施碳汇管理措施以及在适应并应对气候变化影响的背景下,实现农业生产的发展具有指导价值。
2009年05期 v.10 171-174页 [查看摘要][在线阅读][下载 244K] [下载次数:360 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:9 ] |[阅读次数:48 ] - 祁英香;
根据《中国自然资源丛书》青海卷和青海湖地区共和、海晏、刚察、天峻4县相关统计资料和草地实地考察,提出不同类县域的草地综合利用率,再根据宜用草地面积、鲜草产量及家畜年食用量等计算出青海湖地区各县和全区的草地理论载畜量、适宜载畜量和超载量。①湖区可利用草地面积为338.4万hm2,草地牧草理论生产潜力总量为1353709.4万kg,草地现实潜力总量为661760.83万kg。其中,草地理论生产潜力总量和现实生产潜力总量最高的均为共和县,最低的均为海晏县。②全区理论、现实实际可利用草地潜力总量分别为634253.55万kg、310054.85万kg,其中最高的均为共和县,最低的均为海晏县。③草地理论载畜量为438.63万羊单位,其中,共和县最高(154.30万只),海晏县最低(32.86万只);草地现实载畜量全区为214.42万只羊单位,各县草地适宜载畜量由大到小依次为共和县(79.34万只)、天峻县(65.16万只)、刚察县(55.42万只)、海晏县(15.45万只)。④截至2002年底,全区有各类草食牲畜289.6万头(只),其中,山羊12.3万只,绵羊228.9万只,驴0.24万头,牦牛43.4万头,黄牛0.9万头,骡0.13万头,马3.7万匹,骆驼82峰,全区草地实际载畜量折合为440.69万只羊单位,各县实际载畜量从大到小依次为刚察县(142.17万只)、共和县(136.84万只)、天峻县(108.98万只)、海晏县(52.71万只)。⑤草地理论超载量为12.11万只羊单位,其中,海晏县和刚察县超载43.78万只羊单位,共和县和天峻县分别超载17.47万只羊单位、14.21万只羊单位;草地适宜超载量全区为225.33万只羊单位,超载量由大到小依次为刚察县(86.75万只)、共和县(57.50万只)、天峻县(43.82万只)、海晏县(37.27万只)。全区超载度(现实超载量和适宜载畜量的比值)为1.05,各县超载度由大到小依次为海晏县(2.41)、刚察县(1.56)、共和县(0.72)、天峻县(0.67)。可见,青海湖地区草地超载特别严重,草畜矛盾十分突出。2002年的数据显示,牧业总产值平均约占农业总产值的90%,牧业收入平均约占农村经济总收入的96%,牧民人均纯收入1836~2330元。可见,湖区气候与自然环境条件较为恶劣,生态环境十分脆弱,加上传统观念等人为因素,最终导致湖区畜牧业生产也表现出脆弱性和不稳定性,使畜牧业经济的发展与环境不相协调,畜牧业可持续发展面临严峻挑战。笔者认为可从以下几方面实施青海湖地区畜牧业可持续发展战略:严格控制载畜率,实现草畜动态平衡;进行草畜分而治之;加强草地生态环境建设;加强良种繁育和优质牧草的栽培;提倡规模化、工厂化养殖,培育龙头企业,深化草畜产品加工,走产业化道路;转变传统观念,发展生态畜牧业;加强畜牧业自主创新和科学管理。
2009年05期 v.10 175-178+183页 [查看摘要][在线阅读][下载 314K] [下载次数:221 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:18 ] |[阅读次数:60 ]